人甲状腺抗体,人甲状腺抗体ELISA试剂盒操作说明

人甲状腺抗体,人甲状腺抗体ELISA试剂盒实验原理
        本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲状腺抗体表达。用纯化的人甲状腺抗体抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中甲状腺抗体相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的甲状腺抗体抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人甲状腺抗体的存在与否。
人甲状腺抗体,人甲状腺抗体ELISA试剂盒组成
        130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶
         2酶标试剂6ml×1瓶8阳性对照0.5ml×1瓶
        3酶标包被板12孔×8条9阴性对照0.5ml×1瓶
        4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份
         5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张
        6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个
标本要求 
        1标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
        2不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
人甲状腺抗体,人甲状腺抗体ELISA试剂盒操作步骤
        1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
        2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
        3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
        4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
        5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
        6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
        7.温育：操作同3。
        8.洗涤：操作同5。
        9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
       10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
        11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。