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ELISA实验中常见问题的处理方法
1，所有检测孔均无色
原因可能为酶结合物或底物失效，底物漏加（错加），阳性对照漏加或错加，其中以酶结合物失效和底物错加为常见。查找原因的方法是将酶结合物与底物直接混合，观察有无显色；如显色则提示为阳性对照漏加或底物错加所致；若不显色，新酶结合物与底物混合，观察有无显色；不显色则提示底物失效，显色则提示原用酶结合物失效。在确定底物错加或失效者，若未加终止液，可重新洗板再显色。
2，所有显色孔均显色
原因多为洗板不净（孔内残留未结合的酶结合物）或显色时间过长。洗板是ELISA检测重要环节，应严格按照说明书进行，可以适当延长浸泡时间，增加洗涤次数1-2次，否则极易导致假阳性（竞争YZ法为假阳性）结果。
3，质控孔无色
一般为酶结合物活性降低所致（排除底物错加，失效及漏加质控物），质控物一般为临界值的，是确定试验成功与否的中药依据。阳性对照虽然显色，但可以发现其吸光度变化较大，该批试验须重做，防止弱阳性结果的漏检。
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