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技术在线解答浙江大学学生ELISA洗板操作相关问题

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七月初,浙江大学张同学由学校实验室的其他同学介绍与我司取得联系。并订购了人MDA、GSH-PX、SOD、TAOCELISA试剂盒。星期一老师做了人GSH-PXelisa实验。介绍自己在洗板操作过程遇到棘手问题,麻烦我司技术给她提供解决处理方法及建议。主要问题如下:

问题一:说明书上说洗板时要把孔里的水甩干,可我做的时候,无论我怎么拍,孔底还是有残留液体,请问这对试验有没有影响?或着有没有别的什么好的办法可以解决这个问题?

答:有一定的影响.尤其二抗反应后洗涤不好,会出现非特异.ELISA试验中洗涤是关键.尽可能甩干,而且尽量少拍,不一定每次都很干,但是Z后一次洗涤要尽量干.洗涤中另一个值得注意的是尽量不要出气泡.如果有条件的话,可用洗板机。

问题二:什么才叫封闭好了呢?有没有什么标准?

答:一般用1%BSA,150μl,37度,2h,如果还有非特异反应的话,可能有其他原因,比如加样时溅到了壁上或有气泡,洗涤不充分,二抗浓度过高,封闭物不合适以及反应条件是否得当等。

问题三:1%bsa,你是用什么稀释的,我用过pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀释,结果封闭的效果都不怎么明显,与不封闭差不多.

答:1%BSA用PBS稀释就可以了。还有就是要注意你的操作,背景高不一定是封闭的问题。

在我司技术的指导下,张老师相继完成了人MDA、SOD、TAOC三个ELISA实验。并且实验取得预期理想结果。张老师对我司的产品跟服务表示感谢。并表示后续将继续与我司合作且将我司介绍给其他同学。在此,我司对张老师也表示感谢,承诺将一直为客户提供Zyou质的试剂盒跟服务!


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2004-11-28
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