仪器资讯
人富含NK活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化试剂盒实验方法
【产品规格】
100ml/Kit
【产品组成】
为方便广大用户使用，试剂内容如下：
名称
产品编号规格A
密度梯度分离液原液
NK2011H-A
100ml
B
梯度制备稀释液
NK2011H-B
100ml
C
说明书
1份
【实验前准备】
适用仪器：Zda离心力可达1200g的水平转子离心机
【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。
1.收集从外周血中分离的单个核细胞（人全血单个核细胞分离液，产品货号；LDS1075）：1×108个悬于1ml无血清培养基中。
2.梯度分离溶液制备，使用使用梯度制备稀释液参考下表将原液稀释至所需浓度：
原液浓度（%）
83%
79%
73%
70%
66%
比重（g/ml）
1.067
1.064
1.061
1.058
1.056
3.梯度分离层的制备：将梯度分离液由高密度至低密度逐层加入至10ml离心管（试管）内，每层约1.2-1.5ml加入后应可见明显的梯度界面，同时标记70%层上部界面及73%底部界面位置。
4.上样：将单个核细胞单细胞悬液1ml加至梯度界面上。
5.离心：400g，离心20-25min。
6.取样：吸取73%与70%溶液界面及上下两层分离溶液（即步骤3标记位置之间的溶液），
细胞经洗涤后供后续试验。
注：样本量加大时请客户按选取对应耗材且按比例增加试剂用量，但应注意加入试剂及样本
后总体积不超过离心管总体积的2/3。
【注意事项】
1.实验全过程需在20℃±2℃下进行，否则影响离心效果。
2.由于多层分离溶液之间密度差别不大，因此离心机加速、降速时要慢，要平稳。
3.试剂瓶盖需盖紧，防止蒸发和污染。
【储存条件及有效期】常温保存，有效期2年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启封后置常温保存。如4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
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