各种动物组织淋巴细胞分离液试剂盒////索莱宝新增产品
规格:100ml×4
保存:室温避光储存,有效期至少2年。
产品内容:
名称规格
动物组织淋巴细胞分离液100ml
F液100ml
全血及组织稀释液100ml
细胞洗涤液100ml
产品简介:
本分离液为Ficoll、***淀粉550与泛影酸葡甲胺的混合液。组织细胞可在分离液中分层。离心时,
在Ficoll、***淀粉的作用下红细胞与粒细胞聚集并迅速沉降;此时,淋巴细胞及其他单个核细胞仍处于
分离液上层,红细胞污染可忽略不计。大部分血小板可在细胞清洗低速离心过程中去除。其他人及动物多
种比重细胞分离液,因不同种属不同比重分离液的细胞离散系数及细胞带电不同,用户在制定分离液时应
提供所需分离液的比重、动物种属及被分离细胞的名称。
适用于从动物组织中分离淋巴细胞,无菌条件下所分离的淋巴细胞可用于细胞培养等。本品仅供科研
使用。
注意事项:
A.本实验要求,在正常大气压下,分离液、分离样本以及分离环境温度为20℃±2℃。分离液在低温时呈较
高密度,在高温时呈较低密度。细胞分离液从冰箱取出后,不可立即使用,操作前可将样本和分离液复温
至18-22℃。为获得佳的实验结果,好在获得样本后2小时内进行实验,存放时间越长细胞活性越低。
B.实验过程中,如需匀浆组织或洗涤细胞,不可使用含Ca、Mg离子的缓冲液及培养液,其成分会大大降
低细胞得率及纯度。
C.优抗凝剂选择:EDTA、枸橼酸、肝素,其他抗凝剂也可使用,但会影响细胞活性。应注意在血液稀
释过程中去除抗凝剂体积。
D.实验操作时,不可使用含粉手套、不可使用内毒素含量过高的液体,手套中的粉末颗粒及高内毒素会激
活淋巴细胞从而降低细胞得率及活性。
E.本实验不可使用高聚合材质(如聚苯乙烯)的塑料制品,其带有的静电作用将导致细胞贴壁影响分离效
果。
F.吸取过多的淋巴细胞层及分离液层会导致分离液交界处的粒细胞被吸出从而使混杂的粒细胞数量增加。
吸取过多的淋巴细胞层上层溶液会导致血浆蛋白及血小板混杂。
G.如需进行B、T细胞计数,则需血液贮藏时间不得多于10小时,否则将导致细胞被激活,得率降低。
H.细胞纯度可在步骤7后使用瑞氏染色方法确定,细胞活性可用台盼蓝处理后观察。
I.适用半径15cm水平转子离心机。由于各品牌离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,
可能影响分离效果,用户可以调节离心转数和离心时间,摸索佳的分离条件(具体分离条件各实验室自
定)。
单细胞悬液的制备:
A,组织匀浆液需现用现配,配制方法为:40ml胎牛血清与60mlF液混匀,备用(现用现配)。
B,本试剂盒中不包含胶原酶,若采用酶消化法制备单细胞悬液,请用户根据各实验室要求另购不同类
型胶原酶。
1.剪碎法:将组织块放入平皿后,加入少量组织匀浆液;用眼科剪将组织剪至匀浆状,加入5ml组织匀浆
液;用吸管吸取组织匀浆,用100目不锈钢滤网过滤到试管内;离心沉淀1500转/分×3min,再用细胞洗涤
液清洗3次,每次以500rpm短时低速离心除去细胞碎片,以200目不锈钢滤网过滤去细胞团块。作细胞计数
并调整细胞浓度为(2~5)×107个/ml。常温下放置,待测细胞的活力。分离前将细胞浓度调整到为2×
108-1×109个/ml的单细胞悬液备用。
2.匀浆器法:用眼科剪将组织剪成小块;放入70ml组织研磨器内,加入组织匀浆液;缓慢转动研棒,研磨
至匀浆;用5ml组织匀浆液冲洗研器;收集细胞悬液,经200目不锈钢滤网过滤;离心沉淀800rpm×2min,
再用细胞洗涤液洗3次,离心沉淀。作细胞计数并调整细胞浓度为(2~5)×107个/ml。常温下放置,待测
细胞的活力。分离前将细胞浓度调整到为2×108-1×109个/ml的单细胞悬液备用。常温下放置,待测细胞的活
力。分离前将细胞浓度调整到为2×108-1×109个/ml的单细胞悬液备用。
3.酶消化法:
A.用F液将胶原酶稀释,终浓度为400U/ml,至于冰浴备用。
B.取一适当大小培养皿进行操作:用镊子夹碎动物组织,加入稀释后的胶原酶,37℃消化20分钟。
C.以100或200目不锈钢滤网过滤,离心沉淀800prm×2min,再用细胞洗涤液洗3次,离心沉淀。作细胞
计数并调整细胞浓度为(2~5)×107个/ml。常温下放置,待测细胞的活力。分离前将细胞浓度调整到为2
×108-1×109个/ml的单细胞悬液备用。
索莱宝常备试剂盒
P8610人外周血淋巴细胞分离液solarbio200ml瓶
P8670人外周血白细胞分离液solarbio200ml瓶
P8630大鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒solarbio200ml瓶
P8620小鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒solarbio200ml瓶
P8740鸡外周血淋巴细胞分离液试剂盒solarbio200ml瓶
P8640牛外周血淋巴细胞分离液试剂盒solarbio200ml瓶
P8760兔外周血淋巴细胞分离液试剂盒solarbio200ml瓶
P8770猪外周血淋巴细胞分离液试剂盒solarbio200ml瓶
P8730狗外周血淋巴细胞分离液试剂盒solarbio200ml瓶
P8750豚鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒solarbio200ml瓶
P8700鱼(淡水)全血淋巴细胞分离液solarbio100ml瓶
淋巴细胞分离液及分离试剂盒还有其他种属,请联系010-56371212
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