实时荧光定量PCR具有灵敏度高、特异性高和精确性高的优点,此项技术已被应用于分子生物学、医学、食品检测和环境监测等多个领域。
在食品检测方面的应用
1.转基因
利用荧光定量PCR技术扩增放大转基因信号。
2.微生物
食品安全和人民群众的生活息息相关,在生产、储藏、运输、销售等一系列过程中,食品会受到来自微生物的污染。食品中的致病菌可以通过荧光定量PCR技术来检测。
在环境监测方面的应用
河流中环境微生物随着季节变化的情况能够通过实时荧光定量PCR技术被检测出来,地表水和饮用水中致病菌也可以通过实时荧光定量PCR技术进行检测。
在分子生物学领域的研究应用
1.用于单核苷酸多态性(SNP)检测分析
不同人群对疾病的易感性和对同一种药物ZL同一种疾病的效果也不形同,个体差异的遗传是基于遗传物质DNA的多态性RELP,STR,ABO血型和SNP。SNP广泛地存在于人类基因组中,为Z常见的一种人类可遗传变异,对于遗传性疾病的研究具有重要的意义。
2.DNA甲基化检测
表观遗传学重要的标记信息为DNA甲基化,对于表观遗传学的时空特异性研究来说,由实时荧光定量PCR技术将基因组甲基化水平数据得到具有重要意义。
3.定量核酸浓度
核酸浓度测定的传统方法是使用分光光度计或琼脂糖凝胶电泳,测定的结果不仅不够精确而且容易受到污染。上述的问题通过实时荧光定量PCR就能够解决,实时荧光定量PCR具有很高的准确性和灵敏度并且没有污染。该技术是定量分析某些传染性疾病和检测病原微生物和病毒的shou选。
4.研究基因表达
基因时间、空间表达水平差异的比较能够应用实时定量PCR技术。
在医学领域的研究应用
1.用于病原体检测
定量常规PCR做不到,在操作中容易受到污染从而使假阳性结果出现,然而该问题应用实时荧光定量PCR技术能够解决。提供疾病的诊断和ZL依据、抗结核药物ZL后病人痰样本病原体DNA含量的定量检测、丙肝病毒、宫颈癌及其癌前病变有关的人类乳头瘤病毒的检测均可以应用该项技术。该项技术还能够对量大肠杆菌样本一次性的检测,非常简单准确。
2.肿瘤基因检测
肿瘤具有非常复杂的发生机制,目前,尚不清楚它的发病机理。随着基因分子水平研究不断发展,目前被人们广泛接受的致癌性发生的根本原因是肿瘤基因发生突变等遗传学改变。在多种肿瘤早期和良性阶段就已经出现癌基因表达异常和突变。
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