液相色谱仪检定经验

　　液相色谱仪是实现液相色谱分析的重要工具之一，使用液相色谱仪的领域越来越广泛。液相色谱仪在使用过程中的检定方法是需要十分重视的，如果不按照规定的检定方法，会导致液相色谱仪在使用过程中产生各种不确定因素，影响检定结果。标准物质的不确定度、操作人员的熟练程度、检定人员对规程的理解程度、进样量等因素都会影响液相色谱仪的检定结果，使检定难度大大增加。

泵流量检定经验分析

　　1、泵流量检定方法

　　按规程要求设定流量、启动液相色谱仪，待压力稳定后，在规定时间内收集流动相，同时用秒表计时，出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，在天平上称重，重复测量3次，则根据公式即可计算泵流量设定值误差SS和流量稳定性SR。

　　2、泵流量检定经验

　　(1)液相色谱仪在收集数据的同时要注意把相关的实验材料保管好。收集流动相和计时尽量由一个人完成，减少计时误差;因甲醇容易挥发，所以要掌握好实验的速度和时间。并且在实验过程还要有条不紊的进行每一个步骤的安排，以便减少实验过程的失误和一定的经济损失。收集时用封口胶密封容量瓶瓶口，收集完一瓶后立刻称量，收集的流动相在换算成体积后保留小数点后三位，并且要把详细的实验记录进行整理，确保实验记录的可靠性。

　　(2)如果液相色谱仪实际流速低于设定值，一般需要清洗或更换单向阀、过滤头;如果流速过高，则需检查流速补偿和压缩补偿调节是否失灵。如果流量不稳，需检查泵头内是否聚集气泡，如有，需打开放空阀，让泵在高流速下运行，排除气泡即可。

柱温箱温度设定值误差和温度稳定性检定经验分析

　　1、柱温箱温度设定值误差和温度稳定性检定方法

　　将数字温度计探头固定在柱温箱内与色谱柱相同的部位，选择35℃和45℃(也可根据用户使用温度设定)进行检定。按液相色谱仪说明书操作，通过升温，待温度稳定后，记下温度读数并开始计时，以后每隔10min记录一次读数，共记录7次，求出平均值，平均值与设定值之差为柱温箱温度设定值误差△TS，7次读数中Zda值与Z小值之差为柱温箱温度稳定性TC。

　　2、柱温箱温度设定值误差和温度稳定性检定经验

　　温度的升高在通常情况下会加大理论塔板数，峰和峰之间的距离变小，但是要保证每个峰的面积不变，所以在峰距变小的情况下，峰的高度就会，所以温度升高会使保留的时间变短，而温度降低正好相反，需要延长保留时间。

基线噪声和基线漂移检定经验分析

　　1、基线噪声和基线漂移检定方法

　　液相色谱仪选用C18色谱柱，以1**%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，紫外检测器的波长为254nm，检测灵敏度调到Z灵敏档，开机预热，待液相色谱仪稳定后记录基线30min，选取基线中噪声Zda峰-峰高对应的信号值，计算基线噪声，用30min内基线偏离起始点的Zda信号值表示基线漂移。

　　2、基线噪声和基线漂移检定经验

　　(1)检定噪声和漂移时，不能有标准物质通过检测器，只有1**%甲醇作流动相，液相色谱仪中不能有1**%甲醇以外的其他物质作为流动相。

　　(2)基线出现波动，毛刺等现象，应检查流动相中是否混入空气形成气泡，或考虑等待氘灯稳定情况，同时检查液相色谱仪的接地是否良好，必要时换新的氘灯。漂移过大，流动相中含有杂质，检查泵、色谱柱、储液瓶和流动相有无污染物。

　　(3)要注意单位的换算。若工作站显示屏的纵坐标为mV时，要换算成规程所要求的AU，即：1mV=1×10^-3AU。

Z小检测浓度检定经验分析

　　1、Z小检测浓度检定方法

　　液相色谱仪Z小检测浓度的检定方法与上面的基线噪声条件相似，由进样系统注入(10-20)微升的1.00×10^-7g/mL的萘-甲醇溶液，并且严格根据相应的操作步骤记录色谱图，并且根据CL=2NdcV/20H的公式对Z小检测浓度进行计算。

　　2、Z小检测浓度检定经验

　　需要注意的是公式中分母的数字指根据20微升的进样体积完成计算工作，并非根据浓度完成计算工作。