解决方案

凯氏定氮仪测定大豆中蛋白质溶解比率

1 前言

蛋白质溶解比率,即大豆水溶性蛋白质含量占大豆粗蛋白质含量的百分率。水溶性蛋白质,指的是可溶于水的蛋白质。《GB/T 31785-2015 大豆储存品质判定规则》中指出蛋白质溶解比率是大豆储存品质关键指标之一。本实验根据国标给出的方法对大豆的蛋白质溶解比率进行测定。


2 仪器与试剂

2.1仪器

K1160全自动凯氏定氮仪,SH420F石墨消解仪,离心机,分析天平 。           


2.2试剂

硫酸(分析纯),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠,混合催化剂(3gK2SO4、0.2gCuSO4),0.1mol/L硫酸标准滴定液。


3 实验方法

3.1粗蛋白测定

3.1.1试样制备

将大豆粉碎使90%以上通过60目筛。


3.1.2取样

称取混合均匀的样品0.2g(精确至0.1mg)左右,加入消化管。加入混合催化剂:3g硫酸钾,0.2g硫酸铜,沿消化管壁加入浓硫酸10mL。


3.1.3消解

表1 消解参数设置

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3.1.4测试

表2 定氮仪参数设置

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3.2可溶性蛋白测定

3.2.1试样制备

将大豆粉碎使90%以上通过60目筛。


3.2.2提取可溶性蛋白质

称取粉碎试样5g(精确至0.01g,本次取5.00g)于磨口带塞锥形瓶中,加水200mL,摇匀使均匀分散,然后在25℃~30℃温度下震荡2h,取出后将混合液转移至250mL容量瓶中,用水稀释至刻度,混匀后静置1min~2min,将上层清液倒入离心管中,在转速为1500r/min的离心机中离心10min,再将离心液用快速滤纸或玻璃纤维过滤,收集清晰滤液于锥形瓶中,即为样品水溶性蛋白质测定液。


3.2.3消解

吸取测定液10mL于消化管中,加入混合催化剂:3g硫酸钾,0.2g硫酸铜,沿消化管壁加入浓硫酸10mL。

表3 消解参数设置

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3.2.4测试

表4 定氮仪参数设置

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4 结果与讨论

4.1实验结果

表5 大豆中蛋白质溶解比率测试结果

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式中50 为样品定容稀释倍数

4.2结论

测试结果显示本次测试的大豆的蛋白质溶解比率为81.74%,大于《GB/T 31785-2015 大豆储存品质判定规则》中规定的75%,属宜存大豆。


参考文献

[1] GB/T 31785-2015 大豆储存品质判定规则

[2] GB 5009.5-2016食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定[ S ] .



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