血清中四环素类药物的测定

1、样品准备 制备3-5 mL 血清，低温保存。取2 mL 血清加入40 μL 磷酸，混匀，待净化。

2、净化

a 活化： 将3 mL 甲醇、3 mL 水依次加入ProElut PLS 60 mg/3 mL (Cat.#68003)，流出液弃去；

b 上样： 将样品加入PLS 柱，流出液弃去；

c 淋洗： 5% 甲醇水溶液淋洗小柱，淋洗液弃去，然后将小柱抽干；

d 洗脱： 3 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液；

e 重新溶解：30 oC 下将洗脱液减压蒸馏至干，用1 mL 流动相溶解，经0.22 μm 滤膜，HPLC 分析

色谱柱：Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)

流动相：甲醇/ 乙腈/ 0.01 mol/L 草酸水溶液=15/15/70

流速：1.0 mL/min

进样量：20 μL

柱温：30 oC

检测器：UV 365 nm

适用于人与动物血清中土霉素、四环素和金霉素等四环素类药物的检测。

1. 土霉素；2. 四环素；3. 金霉素