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北京迪科马科技有限公司时间:
2019-12-31行业:
制药/化妆品 化学药
1、血液处理 制备3 - 5 mL 血浆,移取2 mL,加入1 mL 20% 氯化钠水溶液,混匀,待净化。
2、硅藻土柱净化
a 上样: 将样品加入ProElut LLE+ 3 mL* (Cat.#62503),样品在重力的作用下渗入填料;
b 平衡: 静置10 min,使样品在硅藻土表面充分浸润;
c 洗脱: 向柱中加入15 mL ,打开控制阀,调节流速使洗脱液成滴流下,接收洗脱液;
d 重新溶解:25 oC 下将洗脱液减压蒸馏至干,用1 mL 甲醇溶解残渣。将溶解液在-18 oC 下放置3 h,用微孔滤膜过滤后,HPLC 分析
注: “3 mL” 是指硅藻土柱的Zda上样量,如果样品量超过这一数值,样品会流出小柱;添加样品量应尽量接近Zda上样量,否则会有部分洗脱液被扣留,影响回收率;样品量一定时,应选择Zda上样量稍大于样品量的小柱,差值用20% 氯化钠水溶液补足。
色谱柱:Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)
流动相:甲醇/ 水=98/2
流速:1.0 mL/min
进样量:20 μL
柱温:35oC
检测器:UV 300 nm
适用于血浆中维生素A 和维生素E 的检测。
1. 维生素A;2. a- 维生素E