蜂蜜中阿维菌素的测定

净化：ProElut C18 500 mg/6 mL (Cat.#63105) 或ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#68004) 

1、提取 5 g 蜂蜜加入25 mL 水，剧烈振荡，使蜂蜜完全溶于水中。

2、净化 ProElut C18 500 mg/6 mL (Cat.#63105) 或ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#68004)

a 活化： 向柱中依次加入6 mL 甲醇、6 mL 水，流出液弃去；

b 上样： 将样品加入柱中*，流出液弃去；

c 淋洗： 用6 mL 水淋洗小柱，淋洗液弃去，然后抽干小柱；

d 洗脱： 用6 mL 乙腈洗脱，收集洗脱液 收集的洗脱液可进行两种不同处理，以便适合两种不同的分析方法： 重新溶解： 50 oC 下将净化液氮气吹干，1 mL 乙腈溶解残渣，微孔滤膜过滤后，LC-MS/MS 分析； 衍生化处理: 50 oC 下将洗脱液氮气吹干，加入100 μL N- 甲基咪唑- 乙腈溶液（1/1），涡旋混合30 s，然后加入150 μL 三氟乙酸酐- 乙腈溶液（1/1），涡旋混合30 s，然后加入750 μL 甲醇，静置15 min，微孔滤膜过滤后HPLC 分析

注： 由于样品量超过柱容量，应分次上样或在SPE 柱上安装60 mL 储液管 (Cat.#4812)，适配器 (Cat.#4803)

方法1，HPLC 色谱柱：Diamonsil C18(2) 150 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99601)

流动相：甲醇/ 水=92/8 (V/V)

流速：1.0 mL/min

进样量：20 μL

柱温：25 oC 检测器

荧光检测器，激发波长：365 nm ；发射波长：475 nm

方法2，LC-MS 色谱柱：Diamonsil C18(2) 150 x 2.1 mm ID, 3 μm (Cat. #99613) 

流动相：乙腈/ 0.1% 乙酸水溶液=75/25

流速：0.2 mL/min

进样量：10 μL

柱温：30 oC

检测器：串联质谱，APCI 负离子模式

适用于蜂蜜中阿维菌素的检测。

1. 阿维菌素