DNA实验室常用的DNA提取方法有Chelex100法、有机法、磁珠法、盐析法、NaOH法等，本文详细介绍这些方法。

(一)Chelex100法 

原理：Chelex100是一种螯合树脂，由苯乙烯、二乙烯苯共聚体组成，含有成对的亚氨基二乙酸盐离子，起着螯合基团作用，对多价金属离子有极强亲和力。在低离子强度、碱性及100℃煮沸条件下，可以使细胞膜裂解，并使与DNA结合的蛋白质变性，DNA游离。检材基质中一般含有大量金属离子，在低离子强度及加热条件下，金属离子可以辅助脱氧核糖核酸酶降解DNA，也可以YZPCR反应，所以在提取DNA时，加入Chelex100，螯合了金属离子，防止了DNA降解，提高了PCR扩增成功率。

方法：剪取适量血斑、精斑、汗斑、鼻涕斑、指甲、毛根、软组织等等生物检材，置于0.5ml离心管内，加入适量纯水，室温浸泡，13,000rpm离心5min，上清丢弃，管底留约20μl左右液体及检材基质，加入100-200μl 5%Chelex100(有时需加适量PK)56℃15min至数10小时不等，100℃8min，13,000rpm离心5mim，上清备用。

(二)有机法 

原理：有机法提取DNA一般是指用平衡酚(又叫饱和酚)、氯仿等按不同比例混合，采用不同方法提取DNA。DNA易溶于水，不溶于有机溶剂，蛋白质分子表面带有亲水性基因，很容易进行水合作用，并在表面形成一层水化层，使蛋白质分子能够顺利地进入到水溶液中，形成稳定的胶体溶液。在有机溶剂存在的情况下，破坏了蛋白质胶体溶液的稳定性，使蛋白质变性沉淀，离心后，有机溶剂于试管底层(有机相)，DNA继续稳定的存在于上层水相，蛋白质沉淀存在于两相之间。水相中的DNA在大量冷无水乙醇及单价阳离子存在的情况下，水会溶于乙醇中，而DNA从水相中析出，沉淀，通过离心回收。

方法：剪取适量检材，置于0.5ml离心管内，清洗方法同用Chelex100法提取DNA，加入适量纯水及终浓度为100μg/ml PK，37℃-56℃孵育15min至数10小时，有时间隔一段时间补加适量PK → 13,000rpm 5min → 吸上清于另一管 → 加入等体积平衡酚 → 振荡或颠倒彻底混匀 → 13,000rpm 5min →吸上清水相于另一管，加入等体积1：1混合平衡酚：氯仿 → 振荡或颠倒彻底混匀 → 13,000rpm 5min → 吸上清水相于另一管 →加入等体积氯仿 → 振荡或颠倒彻底混匀 → 13,000rpm 5min → 吸上清水相于另一管 →加入2.5倍体积冷无水乙醇冷冻保存10min以上 → 13,000rpm 5-10min → 弃上清 → 室温凉干或100℃ 5min烤干 → 加入10-20μl纯水 → 室温溶解或100℃5min帮助溶解 → 离心上清备用

(三)磁珠法 

原理：(异)硫氰酸胍(GuSCN)是强烈蛋白变性剂，不破坏蛋白质一级结构，能破坏细胞膜及核膜蛋白，并使核酸酶失活，释放DNA。磁珠可以特异性吸附DNA，与DNA结构及片段大小无关。通过洗涤液洗涤，在仅留有特异吸附DNA的磁珠中加入洗脱液，65℃解离后，DNA释放于洗脱液中。 

方法：5%Chelex100提取DNA上清液或者用裂解液直接提取骨骼、指甲、毛发DNA上清液等约移于0.5ml离心管内 → 加入结合液100ul，磁珠5ul  → 振荡混匀，室温5min → 在磁架上吸弃上清 → 加入洗涤液I 300ul → 振荡混匀 → 在磁架上吸弃上清 → 加入洗涤液II 300ul→ 振荡混匀 → 在磁架上吸弃上清 → 加入洗涤液II 300ul → 室温放置2 min干燥 → 加入30-50μl 洗脱液，振荡混匀 → 65℃ 10min → 速于磁架上吸上清于另一新离心管内，备用。

(四)盐析法 

1988年Miller等报导经典盐析法提取血液DNA，其方法为溶解红细胞后，离心沉渣用PK消化，用大约6M饱和NaCl沉淀蛋白质，离心上清中DNA用无水乙醇沉淀，用TE溶解。

(五)NaOH法

原理：强碱溶解、变性蛋白质，破坏细胞膜及核膜，变性核酸酶，释放DNA，NaOH不破坏DNA一级结构。

方法： 

1、试剂配制 裂解buffer  0.2M NaOH 中和buffer   0.04M Tris-HCL pH7.5  2、实验步骤 5μl或1×1mm血斑 → 加入450μl纯水 → 室温或37℃15-30min → 13,000rpm 5min → 弃上清 → 沉淀中加入20μl 0.2M NaOH（全血室温5min血斑75℃5min） → 加入180μl 0.04M Tris-HCL pH7.5 → 振荡混匀，离心上清备用。