cIEF方法测定AAV（腺相关病毒）的等电点

腺相关病毒（AAV）是由结构蛋白与内部核酸物质组成复制缺陷性病毒，由于其具有表达时间长、特异性强、安全性高、免疫原性低等优势，被广泛认为是介导基因ZL的理想载体之一。

病毒颗粒的衣壳表面暴露的氨基酸侧链决定了AAV具有特定的等电点（Isoelectric Point，pI），内部核酸的填充情况会造成AAV等电点的差异。AAV是通过重组表达生产，不同的血清型及病毒构建的不完整性均可影响产品的等电点，因此等电点的特性可用于鉴别和监控AAV的种类和产品质量。

PA 800 Plus药物分析系统与cIEF等电点测定试剂盒（图1）可以直接分析完整病毒颗粒，不存在污染毛细管或堵塞毛细管的情况，是测定AAV等电点的有效方法，检测结果如图2。

图1. PA 800 Plus药物分析系统与cIEF等电点测定试剂盒

相比于其他方法，SCIEX提供的cIEF等电点测定解决方案具有以下优势：

 · 分辨率高：使用30 cm毛细管，可以得到更高的分离度，有助于了解AAV完整程度（完整包装核酸、部分填充或者未包装核酸）；

 · pI信息准确度高：使用3个pI marker计算等电点，具有线性相关性，结果可靠； 

 · 重现性好：pI的RSD（相对标准偏差）＜2%，纯度的RSD＜5%（n=6）；

 · 方法灵活度高：可针对不同血清型AAV调节不同尿素浓度或两性电解质范围，得到更优异的结果；

 · 方法简便：使用cIEF试剂盒即可完成检测。

图2. cIEF方法分析AAV的等电点

详细信息请参考SCIEX 技术说明：

高铁，陈泓序，李响；毛细管等电聚焦方法（cIEF）测定腺相关病毒（AAV）的等电点；RUO-MKT-02-11344-ZH-A.