化妆品中污染物双酚A的测定—SPE1000-M64

前言

       双酚A，也称BPA，在工业上双酚A被用来合成聚碳酸酯（PC）和环氧树脂等材料。60年代以来就被用于制造塑料（奶）瓶、幼儿用的吸口杯、食品和饮料（奶粉）罐内侧涂层。BPA无处不在，从矿泉水瓶、YL器械到食品包装的内里，都有它的身影。每年，全世 界生产2700万吨含有BPA的塑料。但BPA也能导致内分泌失调，威胁着胎儿和儿童的健康。癌症和新陈代谢紊乱导致的肥胖也被认为与此有关。《化妆品卫生规范》将双酚A列为禁用组分。

       本文参考《GB/T 30939-2014 化妆品中污染物双酚A的测定 GX液相色谱-串联质谱法》提供化妆品中双酚A的检测方法，使用SPE1000全自动固相萃取进行化妆品中双酚A的萃取，并用GX液相色谱进行检测。唇膏的加标回收率为90.9%~99.6%，RSD 为3.4%，护手霜的加标回收率为89.9%~98.4%，RSD 为3.2%。通过SPE1000和M64建立的前处理方法加标回收率及平行性良好，适合化妆品中双酚A的检测。

1、仪器设备及试剂

1.1 仪器设备

       SPE1000全自动固相萃取系统，莱伯泰科公司；

       M64多通道平行浓缩仪，莱伯泰科公司；

       LC600 二元高压梯度GX液相色谱，莱伯泰科公司；

       氨基固相萃取柱（200mg/3mL）。

1.2 试剂

       甲醇、乙腈、正己烷、二氯甲烷（色谱纯 FISHER Chemical）；

       乙酸、氨水（分析纯）；

       正己烷和二氯甲烷混合溶液（75+25，体积比）：量取750mL正己烷与250mL二氯甲烷混合；

       甲醇和二氯甲烷混合溶液（20+80，体积比）：量取200mL甲醇与800mL二氯甲烷混合；

       含1%氨水的乙腈溶液：移取5mL氨水至500mL容量瓶中，乙腈定容；

       流动相：0.1%乙酸水溶液：乙腈=35:65（体积比）；

       标准样品：双酚A，纯度99%；

       标准储备液：准确称取0.01g双酚A（极ng确至0.0001g），用乙腈配制成0.1mg/mL的标准储备液。

       双酚A标准工作液：1μg/mL，准确吸取1mL标准储备液于100mL容量瓶中，用乙腈溶液稀释至刻度。

2、实验过程

2.1样品预处理

2.1.1膏霜等不含蜡质的样品

       称取0.5g样品（极ng确至0.001g），于25mL容量瓶中，用含1%氨水的乙腈溶液定容至刻度，超声波提取20min，经滤纸过滤，吸取15mL滤液至20mL样品瓶中，45℃水浴5psi氮吹浓缩至近干，用10mL正己烷和二氯甲烷混合溶液溶解，过0.45μm滤膜，待净化。

2.1.2 唇膏等含蜡质的样品

       称取0.5g样品（极ng确至0.001g），于25mL容量瓶中，用正己烷二氯甲烷混合溶液定容至刻度，超声波提取20min，经滤纸过滤，吸取15mL滤液至20mL样品瓶中，待净化。

2.2 样品加标

       在2.1样品中加入100μL的1μg/mL双酚A标准工作液，样品的加标浓度为200 ng/g。

2.3 SPE净化及浓缩

       按照图1所示方法进行SPE1000方法编辑，加载并运行方法，SPE1000完成2.2中加标样品的SPE萃取。

样品收集到收集瓶中，在45℃，5psi条件下进行氮吹浓缩，当收集液浓缩到近干时，加入流动相定容至1mL，涡旋混匀，0.22μm滤膜过滤，待检测。

图1  双酚A固相萃取方法

2.4 GX液相色谱检测条件

       色谱柱：C18，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm，或性能相当者；

       流动相：0.1%乙酸水溶液：乙腈=35:65；

       流速：1.0mL/min；

       紫外检测波长：278nm；

       柱温：35℃；

       进样量：20μL。

3、实验结果

3.1双酚A标样液相色谱图

       图2为双酚A标样的液相色谱图。

图2  双酚A标样液相色谱图

3.2 空白样品色谱图

       图3为唇膏空白样品的色谱图，在双酚A的出峰时间处有响应，说明该样品中有双酚A检出。

图3 唇膏空白样品色谱图

3.3 加标样品色谱图

       图4、5分别为唇膏和护手霜加标样品的色谱图。

图4 唇膏加标样品色谱图

图5 护手霜加标样品色谱图

3.4 加标回收率结果

       表1为加标回收率结果，唇膏的加标回收率为90.9%~99.6%，RSD 为3.4%，护手霜的加标回收率为89.9%~98.4%，RSD 为3.2%。

表1 加标回收率结果

4、结果与讨论

       本文使用SPE1000全自动固相萃取系统进行化妆品中双酚A的萃取，经M64氮吹浓缩后用GX液相色谱进行检测。测定唇膏的加标回收率为90.9%~99.6%，RSD 为3.4%，护手霜的加标回收率为89.9%~98.4%，RSD 为3.2%。通过SPE1000全自动固相萃取和M64多通道平行浓缩仪建立的前处理方法加标回收率及平行性良好，适合化妆品中双酚A的检测。实际唇膏中双酚A检出26.9ng/g，护手霜未检出。

5、参考标准

1、GB/T 30939-2014 化妆品中污染物双酚A的测定 GX液相色谱-串联质谱法

2、SN/T 3822-2014 出口化妆品中双酚A的测定 液相色谱荧光检测法