EZsepC18固相萃取柱应用于水果蔬菜茶叶中吡虫啉药物残留量的检测

2024-07-1248

前言

吡虫啉是烟碱类超高效杀虫剂，具有广谱、高效、低毒、低残留，害虫不易产生抗性，对人、畜、植物和天敌安全等特点，并有触杀、胃毒和内吸等多重作用。害虫接触药剂后，中枢神经正常传导受阻，使其麻痹死亡。吡虫啉易溶于乙腈和二氯甲烷，化学结构稳定，会对人类和哺乳动物产生慢性毒理效应。

本实验参考国标《GB/T 23379-2009 水果、蔬菜及茶叶中吡虫啉残留的测定高效液相色谱法》，使用EZsep?C18固相萃取柱进行样品净化，E.T.氮吹浓缩仪进行浓缩，高效液相色谱进行检测，建立了一种对水果蔬菜茶叶中吡虫啉药物残留进行检测的分析方法。

关键词：

农药残留；吡虫啉；EZsep?C18固相萃取

实验过程

1.1 仪器与试剂

SPE1000全自动固相萃取系统（北京莱伯泰科仪器股份有限公司）；

LC600二元高压梯度高效液相色谱（北京莱伯泰科仪器股份有限公司）；

E.T.氮吹浓缩仪，货号：C020017，北京莱伯帕兹检测科技有限公司；

EZsep?C18固相萃取柱（500mg/ 6mL），货号：PZ10303，北京莱伯帕兹检测科技有限公司；

离心机，H1850，湖南湘仪实验室仪器开发有限公司；

乙腈，甲醇等试剂均为色谱纯，购自Fischer公司；

氢氧化钠，氯化钠等化学品均为分析纯或以上，购自国药集团化学试剂有限公司；

甲醇中吡虫啉标准溶液，100μg/mL，坛墨质检科技股份有限公司。

1.2 工作液配制

取吡虫啉标准溶液1mL，用甲醇稀释至10mL容量瓶中，配制成浓度为10μg/mL的吡虫啉标准中间液。

分别移取10μg/mL的吡虫啉标准0.05、0.1、0.2、0.5、1.0mL用乙腈稀释至10mL容量瓶中，得到浓度分别为0.05、0.1、0.2、0.5、1.0μg/mL的标准工作溶液。

1.3 实验部分

1.3.1 提取

1.3.1.1 水果蔬菜样品

将水果蔬菜打碎，称取10g试样于100mL离心管中，加入20mL乙腈，用均质器在15000 r/min匀浆提取1min，加入5g氯化钠，再匀浆提取1min，将离心管放入离心机，在3000 r/min离心5min，取上清液10mL（相当于5g试样量）加入60mL样品管中，在40℃氮吹浓缩至近干，加入2mL10%乙腈水溶液，涡旋振荡30s充分溶解，待净化。

1.3.1.2 茶叶样品

茶叶样品用固体样品粉碎机粉碎，称取5.0g试样加入50mL乙腈，振荡提取1h，用离心机4000r/min离心5min，取40mL上清液加入100mL具塞量筒中，加入配制好的20mmol/L 氢氧化钠、氯化钠饱和溶液40mL，剧烈震荡1min，分层，取出乙腈层20mL，加入60mL样品管中，在40℃氮吹浓缩至近干，加入2mL10%乙腈水溶液，涡旋振荡30s充分溶解，待净化。

1.3.2 净化

将EZsepTMC18固相萃取柱（500mg/6mL，货号：PZ10303）分别以5mL乙腈、5mL水活化后，加入待净化液，再分别以10mL20mmol/L氢氧化钠溶液，10mL水淋洗，抽干，以1mL乙腈洗脱并收集洗脱液，以E.T.氮吹浓缩仪，40℃氮气浓缩近干，再以流动相定容至1.0mL，超声溶解，过0.22μm微孔滤膜后，供HPLC测定。

1.4 LC分析

色谱柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm），

流动相:0.1%磷酸水溶液（V/V）：乙腈=8:2；

流速：1.0mL/min；柱温：35℃；

外检测波长：270nm进样量：50μL。

实验结果