丢掉“直男癌”,实验样品要“宠”的!
2024-04-2562什么?听说隔壁精心培养的细胞又死了?!师兄悲痛欲绝......
别吃瓜!
灵魂拷问:你的样品完整性还好嘛...
不想样品被破坏,却总被现实刺痛和伤害?
大师解答:方法不对!高标准+敏感肌+内心脆弱+细节控=样品,关键得“宠”!
样品完整性是确保研究结果科学可靠的关键要素。实验过程中若样品被改变或污染,极易导致结论无效,如出现假阳性或假阴性等。打击信心(KO!)& 耽误整体研究进程(Double KO!)& 产生可怕的潜在后果(Triple KO!)
这就好比五星级米其林大厨进行菜式创新,需在确保食材新鲜干净的前提下,才能思考通过何种方式烹饪,以发挥食物Z大的价值。资深吃货相信:即使是天水麻辣烫,原材料馊掉了,那也百分百难吃!
除去污染风险,许多其他因素,如温度和光照等均会影响样品的完整性。本文针对实验环节中的关键组成部分:移液技术、移液器储存、环境因素、样品储存和运输这五个方面,为大家整理了一些实用Tips:
正确移液
错误的移液方式可能导致三种污染:样品到移液器、移液器到样品或残留(样品到样品)。
正确移液=使用正确的工具+提升个人移液技巧。前者包括为样品类型选择合适的移液器,以及选择合适的移液器吸头(见往期内容回顾),后者需增强不正确移液操作的意识并及时纠正:
影响因素 | 影响程度 | 正确方式 |
移液器吸头泄漏/密封不良 | 可能会影响0.5%至50%精度 | 使用原装或推荐品牌的移液器吸头 |
重复使用移液器吸头 | 可能会对准确度产生高达4%的影响 | 单次使用一次性吸头 |
移液器吸头内外表面不平整 | 影响高达10%的准确度 | 使用合格的移液器吸头 |
实际待移取的液体与调节移液器所用的蒸馏水之间的蒸气压存在差异 | 可能会影响精度高达 2% | 润洗吸头2-3次 |
移液器吸头表面附着液滴 | 可能影响精度高达3% | 吸头沿容器壁滑动以排尽液滴(滑动距离8-10mm) |
移液过程中吸头的浸润深度及操作角度不当 | 可能影响精度高达1% | 吸液时保持移液器垂直* |
移液节奏不规律 | 对准确度产生高达1.5%的影响 | 保持移液节奏连续平稳(遵循“慢吸快排”原则) |
活塞组件损坏漏液 | 可能影响精度高达1%-50% | 定时检查移液器是否漏液 |
活塞运动不均匀 | 可能会对精度造成高达 0.5% 的影响 | 确保活塞平稳运行(适时维护+保持吸排液节奏平稳) |
信息摘自 ISO 8655-2 – 附录 B
*Gilson 建议10°至45°贴壁排液
此外还可通过调整移液位置、姿势等减少伤害,缓解疲劳,从而降低出错的风险:
姿势:保持大小臂垂直,移液时不要扭动或旋转手腕,握持移液器时放松
位置:长时间站立可能导致腿部静脉曲张,建议坐着移液(凳子与工作台不要太远哦)
其他:实验前将样品及工具整齐放置于台面,便于使用;20分钟放松休息一会
垂直存放移液器
确保正确的移液器存放方式,不仅与移液器本身有关,还会影响液体处理过程中的样品完整性,将移液器随意放置在工作台上会带来多种风险:
台式污染:将移液器吸头放在工作台上意味着如果工作台面不完全清洁,移液器吸头可能会被污染
内部污染:将移液器水平放置(在工作台上或其他地方)有液体进入并污染/腐蚀移液器部件的风险
再强的将士也得回家修养,为了保持战斗力,要耐心一点将移液器准确归位嗷~
环境因素
温度:高温可能会破坏某些反应,例如在PCR过程中杀死酶活性,从而破坏样品的完整性;同时会影响液体处理:密度随温度而变化,如果实验室温度不一致,则无法保障移取样液体积的一致性。
湿度:湿度越低,蒸发率越高,移取样液可能的误差就越大,出现气溶胶污染的风险也随之增加。
往下滑,还有一半知识点
样品储存
如果样品储存不当,它们可能会暴露在空气、冰箱和采样工具中的污染物中。需将样品储存在适宜的惰性容器中,并设置好储存温度。
样品运输
为避免样品被破坏,应选择适宜的运输方式:
运输容器
与上述样品储存类似,样品必须仔细包装才能运输,否则有污染的风险。为避免影响完整性,样品必须装在正确密封的容器中,没有裂缝,并远离空气中的污染物。必要时应用单独的塑料袋包裹,并将它们放入装有吸收剂的较大容器中,以降低污染风险。较大的容器应为聚苯乙烯泡沫塑料盒或绝缘保温瓶(针对适用样品)。
物理因素
有些样品必须在低温下储存,否则有分解的风险。必要时使用便携式冰箱或冰袋保持温度,以保持样品完好无损。此外,一些样品非常敏感,可能会因晃动或暴露在日光下而损害其完整性,因此在运输过程中要做好标签(易碎物品)等,给快递小哥一些提示,并尽量减少样品周转时间。
标签
张冠李戴不可取,请确保正确标记所有样品,必要时应注明适用范围及使用注意事项等。
打
卡
成
功
知己知彼方能百战百胜
熟知实验样品的“脾气秉性”
把握细节,投其所好,提升自我
前进的路上障碍重重
但Gilson始终陪你前行
各位小伙伴努力学习,勇敢向前吧!!!
关于GILSON
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