文档简介pUC-TTA载体是一种GX克隆PCR产物的专用载体,它是由pUC18载体在EcoRV酶切位点处切开,在两侧的3′端添加T而成。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR产物的3′端添加一个A,它可以与pUC-T3′端的T互补连接,因此可大大提高PCR产物的连接和克隆效率。 试剂盒中配备GX率的T4DNALigase和为快速GXDNA连接优化的2×QuickLigationReactionBuffer。连接效率相当于用T4DNALigase进行常规连接1小时。带有插入片段的重组子可根据α互补原理,进行蓝白斑筛选,判断载体中有无外源基因的插入。克隆后可以用BcaBESTSequencingPrimers和M13通用引物对PCR产物进行测序。
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