细胞尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂（uPA）活性比色法定量检测

文档简介主要用途细胞尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂（uPA）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过三肽化合物底物p-ERG-pNA受到尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂的水解，释放黄色对硝基苯胺，产生吸光峰值的变化，即采用比色法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体等）尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂（uPA）的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂（urokinase-typePlasminogenActivator；uPA；EC3.4.21.73），又称为尿激酶（urokinase；UK），属于丝氨酸蛋白酶，存在于血液、细胞外基质和尿液中。尿激酶由411氨基酸构成，分子量为54KD，有3个结构域：丝氨酸蛋白酶结构域、kringle结构域和生长因子结构域。其主要的生理性底物为纤维蛋白溶酶原（Plasminogen），即纤维蛋白溶酶（plasmin）的酶原形式（zymogen），切离部位为Cys-Pro-Gly-Arg⊥Val-Val-Gly-Gly-Cys。一旦切离后激活，纤维蛋白溶酶参与细胞蛋白水解过程，包括血栓溶解（thrombolysis）和细胞外基质降解等。uPA与组织重构、修复、血管形成（angiogenesis）性疾病和肿瘤扩散有关。uPA的YZ剂是丝氨酸蛋白酶YZ剂（serpins），即纤维蛋白溶酶原激活剂YZ剂（PlasminogenActivatorInhibitor；PAI）。基于人工合成的三肽化合物底物p-EGR-pNA（pyro-Glu-Gly-Arg-p-Nitroaniline；焦谷氨酸酰甘氨酰精氨酰对硝基苯胺）受到尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂的水解，释放有色对硝基苯胺，在分光光度仪（405nm波长）下，测定吸光峰值的变化，来定量测定尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂的活性。其反应系统为：