高效液相色谱（HPLC） 法测血清维生素C 含量.pdf

文档简介极易氧化,这使其测定具有很大难度。据报道,测定维生素C常用以氧化还原为基础的比色法或衍生反应为基础的荧光法,但这些方法操作复杂费时,在样品处理过程中很容易使维生素C损失,且没有高的灵敏度和极ng确度[1,2]。为了寻找更好的维生素C测定方法,使其更适用于社区或流行病学研究,笔者通过对色谱条件的优化,建立了使用先进的二极管阵列检测器（DAD）的GX液相色谱（highperformanceliquidchromatography,HPLC）法。该方法具有简便、快速、准确、灵敏的特点。1　材料与方法111　材料11111　主要仪器:BeckmanGX液相色谱系统:Novean色谱工作站,168型二极管阵列检测器（DAD）,ALLTIMAODS#C18柱5L（250mm×416mmi.d）,7752i手动进样器;DL2120超声波清洗器;GTL216AL高速台式低温离心机。11112　试剂:维生素C（SIGMA,ChemCo,USA,色谱纯）;磷酸二氢钾、磷酸、甲醇、偏磷酸,以上试剂均为分析纯;实验用水为去离子双蒸馏水。112　方法11211　色谱条件的优选:根据对流动相的种类、浓度及pH值的优选,本实验的**色谱条件为:色谱柱:ALLTIMAODSC18柱5L（250mm×416mmi.d）;流动相:100mmol?LKH2PO4,pH3.00,检测波长:243nm;流速:1ml?min;进样量:20Ll。11212　样品预处理:取011ml血清,加