Elisa实验:Elisa如果加样,有哪些小窍门!
ELISA实验中,加样 一定是绕不开的一环!ELISA测定操作非常简单,一般涉及到样本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、结果判断和结果报告及解释等方面,其中任一步骤的不当都会影响测定结果,且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚。
ELISA实验中一般需要 4 次加样,即加样本、加检测抗体、加底物和加终止液。
● 实验室使用的微量加样器应注意保养并定期校正。ELISA比较敏感,每孔加入液体量误差会导致读数差别,因此避免仪器带来误差。
● 加样前,溶液充分混匀,加样时不可90度向孔中滴加液体,否则会导致液体残留在吸头上,加样不准确。正确加样方法应为45度,吸头贴着孔壁和液面的交界处加入。
● 加样品时,单孔用量要求:≥50ul/指标,如需要做复孔则所需样本量≥100ul/指标。如果样本量不充足,具体用量可咨询您的专属销售。
● 加样时速度不可过快,否则无法保证微量加样的准确性和均一性。
● 加样时避免液体溅出,如有样本溅出,应用吸水纸轻轻拭干,并做相应记录。
● 每次加样顺序一致,尤其底物、终止液顺序一致,保证每个孔显色时间相同。
● 加完显色液后,放入一个可推拉的抽屉内,就可以避光振荡了。
| 加样防错小窍门
● 用一张写满字的纸,字越多越好,比如报纸,垫在下面,这样,加过标本的小孔看过去下面的字会变小,没加的字正常,非常容易区分。
● 可以利用液面反光与没有加的孔加以区别。
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