食品中脂肪酸检测常见问题（二）

《GB 5009.257-2016 食品安全国家标准 食品中反式脂肪酸的测定》适用于动植物油脂、氢化植物油、精炼植物油脂及煎炸油和含动植物油脂、氢化植物油、精炼 植物油脂及煎炸油食品中反式脂肪酸的测定。

在开展食品反式脂肪酸的检测时，实验员经常会遇到各种小问题，小编今天整理了一些常见问题进行分享学习。

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要检测哪些反式脂肪酸，标准品怎么选择？

标准要求检测食品中C16:1t~C22:1t等16种反式脂肪酸。具体目标物信息可参见标准附录A中的“表A.1 脂肪酸甲酯化学信息表”，详见下图。

针对标准要求的反式脂肪酸，安谱实验推荐的标准品选择方案见下表，分别是6种反式单不饱和脂肪酸甲酯、4种十八碳二烯酸甲酯、8种十八碳三烯酸甲酯。

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反式脂肪酸标品的使用有些什么注意点？

上述推荐的3种反式脂肪酸标准品中十八碳二烯酸甲酯和十八碳三烯酸甲酯均为同分异构体混合物形式，均无准确浓度，这是反式脂肪酸的性质及其生产工艺导致，但这并不影响结果的计算，因为标准中反式脂肪酸的定量方法是面积归一化法，并不需要确定某一个反式脂肪酸的准确浓度，此标准品更重要的作用是目标物的定性。

4种十八碳二烯酸甲酯混标和8种十八碳三烯酸甲酯混标中的目标物信息见下表，可以看出2个混标中分别含有顺-9,12-十八碳二烯酸甲酯（亚油酸甲酯）和顺-9,12,15-十八碳三烯酸甲酯（亚麻酸甲酯）这两种顺式脂肪酸甲酯。因此推荐的3种混标产品中总共含有18个目标物。

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检测食品中反式脂肪酸

还需要检测其他常见脂肪酸吗？

检测食品中的反式脂肪酸需要同时检测其他顺式脂肪酸，上图为国标中反式脂肪酸的计算公式，反式脂肪酸的定量计算是使用归一化法，从公式可以看出需要计算样品中所有脂肪酸甲酯目标物的校准峰面积。通常我们建议可以和《GB 5009.168-2016 食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定》同时检测，因此检测食品中反式脂肪酸还需要采购37种脂肪酸甲酯混标（货号：CDAA-252795-MIX-1ml）进行检测。

需要注意的是“GB 5009.168-2016”和“GB 5009.257-2016”两个标准中脂肪酸的归一化法的计算公式是并不一样，在实际检测过程中需要分别参照标准要求的公式进行计算。下图为使用“GB 5009.257-2016”标准检测大豆油样品中反式脂肪酸的计算公式模板。

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标准品中有一些脂肪酸甲酯的CAS号和标准不一样？

因不饱和脂肪酸甲酯存在顺反异构，以及顺反物质的混合物，因此可能设计多个CAS号，所以需要对标准品的CAS号信息特别注意。特别是“GB 5009.257-2016”中的CAS号信息情况，详见下表，而在“GB 5009.168-2016”中目标物的CAS号信息均正确无误，各位老师可以结合“GB 5009.168-2016”进行目标物CAS号信息的确认。

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有一些反式脂肪酸和顺式脂肪酸分离度较差怎么优化？

在脂肪酸检测过程中常常遇到的一个问题是，顺式脂肪酸 C18:3 6c,9c,12c 和一些反式十八碳三烯酸为同分异构体，且在色谱柱上出峰时间完成重合，无法分离，这样就会导致如果样品中有出峰，则无法判定该目标物是反式和顺式的结构，影响结果判定。小编今天提供2种色谱条件的优化方向供各位老师参考。

色谱条件优化1（降低初始温度，降低升温速率）：

该色谱条件下的谱图见下图：

色谱条件优化2（降低初始温度，降低升温速率，使用梯度流速）：

该色谱条件下的谱图见下图：