直播回顾 | 11月29日《QBD理念下的液相色谱方法开发》

11月29日的CATO直播已圆满结束！由北京市药审中心外聘专家高青老师，精彩主讲的《QBD理念下的液相色谱方法开发》让大家意犹未尽，感谢大家捧场关注！

直播答疑分享

*本期直播答疑共回复28条问题。由于有些老师提出的问题需要结合具体的情况才好判断回答，因此无法针对全部的疑问一一作答，敬请老师们谅解。

1、高主任，自建标准是否都会高于原研标准？特别是对杂质研究上。

答复：自建标准不低于原研，杂质研究也不低于原研。

2、杂质总量是根据什么设计？

答复：杂质总量的限度规定要考虑的因素很多，例如剂型、给药剂量、服用人群、杂质安全性、质量控制难度、稳定性数据等等，具体问题需要具体分析（建议学习ICH和中国药典有关杂质研究的指导原则，以及中国药典2020年版各论）。如果含有的都是一般性杂质，通常原料杂质总量不超过0.5%，风险等级高的制剂，例如注射液杂质总量不得过0.5%，风险级别低一些的，例如片剂不得过1.0%，外用制剂可略宽。基因毒性杂质有相应的指导原则要求，不包含在内。总之，具体情况要具体分析，上述举例也只是一般情况之一。

3、原研是美国的，但是标准不耐受，国内又没有相关的标准，参考的日本的标准，这样是否可行还是说非要自创一个新的标准，与国外的都不一样？

答复：没有规定非得建立与国外不一样的标准，只要经试验证明该方法适用性好即可。

4、复 方制剂有关物质检测时，两个主成分比例相差较大（4：1），一定要进行杂质归属吗？对于不能归属的杂质，以哪个主成分计算杂质比较合适？

答复：要进行杂质归属。不能归属的杂质，以大组分计算自己占便宜，有可能不通过，以小组分计算可能自己吃亏，是否保证效期内合格，是否超过鉴定限，具体问题需要具体分析。无论以哪个组分计算，申报资料里都应进行论证说明，否则依据不足会被发补。或者预先咨询CDE老师。

5、老师，能改变中国药典中的浓度吗？

答复：什么浓度？问题太简单不好回答。如果是指含量或有关物质供试品溶液浓度，只要是满足检测灵敏度，取样有代表性，取样体积不影响定量体积，并且其他验证都没有问题，可以改变。

6、两个方法的杂质互相干扰怎么办呢？

答复：如果杂质用两个方法来做，假设方法A只检测难分离已知杂质（假设杂质X和Y），其他都归方法B，不在方法A里计算；方法B里杂质X和Y不计算，归方法A。

7、老师，药典中规定了出峰保留时间，出峰时间可以更改吗(我把色谱柱换成了小粒径柱长短些的色谱柱呢？

答复：如果建立新方法，换色谱柱，按新方法验证即可，出峰时间按新的来。如果采用药典标准检测，换小粒径色谱柱，梯度程序也得修改，如果需要带入校正因子的就得重新测定校正因子了；如果是等度洗脱，要分析规定出峰时间的目的是什么。总之具体问题具体分析。问题描述太简单，实际情况很复杂。

8、检测波长前半段用一个波长，后半段用另一个波长行不行?

答复：可以。

9、原料的有关物质柱子是印度的，国内买不到，可以换成相同填料的色谱柱吗？还需要进行方法验证吗？

答复：如果方法指定品牌色谱柱，换色谱柱应进行适当验证。

10、 老师，有关物质分析时，已知杂质与未知杂质分离度必须大于1.5吗？

答复：理论上要求基线分离，其他情况需要具体问题具体分析。

11、 对照品和供试品来源不一样时系统适用性用对照还是供试品配啊？

答复：对照品为何要与供试品来源一样？系统适用性用什么根据标准，如果是自己建立标准，自己设计系统适用性溶液，试验初期两个都用比较一下。

12、系统适用性溶液要考察溶液稳定性么？如果考察怎么判断什么时候不在能使用？

答复：系统适用性溶液一般不需要考察溶液稳定性，但是供试品溶液稳定性以及杂质溶液稳定性知道了，系统适用性的稳定性自然可以基本确定。如果希望保存使用一段时间，那么可以进行稳定性试验以确定使用周期。至于何种情况不能用，首先要系统适用性要求，是否还能起到系统适用性职责，与初始图谱对比很重要，是否有降解杂质出现。总之没有明显变化即可以使用。

13、0.1%限度的杂质进样精密度可以到RSD可以放宽到10%吗？

答复：不清楚你这里0.1%限度是多大浓度，如果研究中发现由于浓度低进样精密度不好，可以放宽，至于宽到何种程度，要依据试验数据；但是注意是否有其他原因，例如是否稳定性不好，峰形不好等等，方法如有问题要先解决。

14、浓度低的对照品溶液进样精密度RSD可适当放宽，那我们检验时5+2中5针对照品峰面积大于2%审核时也可以接受是吗？

答复：5+2通常是定量检测，药典限度要求是5针RSD不得过2%；气相外标法不得过10%，内标法不得过5%，这个不能放宽。如果是检测杂质，对照品浓度很小，可以适当放宽，但是我不知道你浓度有多小，需要依据具体试验情况。

15、自身对照法测有关物质，自身对照溶液浓度怎么设计？

答复：根据限度，通常是限度浓度。

16、PPT的响应值是说的峰高还是峰面积除浓度

答复：通常是峰面积。

17、两个参考标准中有关物质的测定分别采用了主成分外标法和自身对照法，是不是优先选主成分外标法啊？

答复：从药典上采用的方法看，自身对照法比较普遍，从审评上来说也没有发现歧视自身对照法，优先主成分对照品法。

18、高老师，含量的分析方法开发时，是否要考虑杂质的干扰？

答复：对的，要考虑，也要建立系统适用性，如果和有关物质方法一致，就不必单独再验证，如果不一致，也要进行专属性试验。

19、刚刚讲到的垂直积分和谷对谷积分，在一针色谱图中，可以主峰和其后面的杂质采用谷对谷积分，其余部分采用垂直积分可以吗？

答复：首先是方法尽可能优化分离度，在无法优化的情况下，按垂直积分好一点，自己吃亏，风险小。

20、有时候对照品的稀释剂和样品的稀释剂不一样，这种可不可以？可不可以通过线性曲线校正后计算？（有时候做溶出度，对照品在某些介质中不是很稳定）

答复：通常溶剂要求是一样的。不一样的溶剂起码不影响检测，例如：如果HPLC方法经验证不影响峰保留时间、响应值等等。你说的校正我没有经验，无法判断。

21、高老师，您好，软件名称能发一下吗？

答复：ACDLabs

22、有关物质检测时，空白溶剂在某一时间处有出峰，供试液在该时间处也有峰，但峰面积比空白的大，那此峰该如何处理呢？

答复：躲不开就扣除。

23、高老师，为什么有关物质有时候溶剂不同杂质检出情况会不同呢？

答复：有的色谱柱还出峰情况不一样呢，应该是溶剂、色谱柱、流动相以及杂质之间的作用。

24、高老师，如果一个药物有药典方法，但是有关物质方法不能将研究的杂质分离，更换为自己开发的方法的话，审评时会不会不被认可呢？

答复：经全面验证，方法可行或优于药典方法，会认可。关键在于申报资料依据充分，如果证据不足，就会不认可。

25、用对照品的话没有辅料呢？

答复：是指滤膜吸附试验吗？考察对照品和供试品各有优势，所以两者都考察。

26、滤膜吸附性实验溶出是每个取样点都考察吗，还是说涵盖溶出浓度范围上下限即可？

答复：涵盖浓度范围即可。

27、配制供试品溶液时如果采用投片法，片子的体积如果对定容体积产生干扰的话，我可以定稀释体积，不定容么，还是要减少投片数量？

答复：你说的定稀释体积什么意思？稀释至102ml?没有这样的做法，也不好操作。如果是精密加入溶剂体积，有，通常体积比较小的，例如精密加入10ml，体积大了，也不太好操作，而且比较麻烦。通常增大体积，例如1片置50ml，那么10片置500ml，当然要根据片子体积，以及溶解后溢出的情况，看具体试验情况确定，也许10片置250ml体积影响也不大。

28、校正因子耐用性多少是可接受的？

答复：目前我没有看到官方说法，要依据你的方法

电子学习证书获取

本期CATO直播电子学习证书，请扫描以下二维码获取。

添加企业客服微信

获取直播课件或了解更多直播相关资讯，可直接扫描以下二维码，添加CATO企业客服微信。

再次感谢各位老师的关注与支持！

下期CATO直播间再会！