进入21世纪以来,生物学进入突破性的发展阶段,生命科学在自然学科中位置起了革命性的变化。其中分子生物学,遗传学,细胞生物学,发育生物学,神经学科,生态学,空间生命科学等学科会逐渐发展成为带头学科。
分子生物学(包括分子遗传学)在生命科学中的主流地位,以及它在推动整个生命科学发展中所起的巨大作用是无可争辩的。细胞是生命活动基本的结构与功能单位,细胞生物学作为生物科学的基础学科地位也需给予重视。提到细胞培养,按照目前的细胞分类主要分为:悬浮细胞和贴壁细胞。而悬浮细胞的培养更是现在生命科学中主流、GX的细胞培养。而悬浮细胞培养实验所需容器也成为科学家工作中的基础工具。
目前常见的三种悬浮细胞培养主要器皿:
1. 三角摇瓶(Erlenmeyer flask)
1861年德国科学家Erlenmeyer为了确保样品反应瓶的受热稳定性,改进了加热容器,发明了锥形瓶。锥形瓶的杰出体现在它的特殊形状上;比起圆形烧杯来说,这种特殊形状增加了器械的稳定性,不易打翻;另外,在震荡过程中,锥形瓶的“瓶颈”让瓶内液体不易溅出,因此在悬浮细胞培养过程中培养液就不会飞溅出容器中,从而保证了反应体系的稳定性。现在典型培养CHO、SF9、NK细胞等,都会选摇瓶进行培养。理论上为了保证很好的溶氧量,摇瓶培养装液量大概为容器体积的10%,实际可能有所增加。
2. THOMSON细胞培养瓶
Thomson OptimumGrowth™ 培养瓶,在哺乳动物细胞及昆虫细胞培养中,细胞表现活力强且蛋白表达量大。Thomson 所有型号的瓶子在细胞培养中,细胞成活率和活性都有显著提高。得益于Thomson 培养瓶独特的低剪切力扰流板,提高通气效率,因此Thomson的装液量可以达到总体积的60%。其他类型的摇瓶ZD装液量只有总体积的30%。Thomson 培养瓶使细胞健康生长,从而提高膜蛋白,分泌蛋白和单抗等目的产物表达量;使昆虫细胞蛋白表达量提高200%。对于一些稳定细胞和瞬时表达细胞,蛋白表达量可以提高300%。
使用Thomson 培养瓶,装液体积比例提高,单位体积表达量的增加。可以大量节省培养瓶和培养基的消耗。Thomson 培养瓶,具有高重复性,不同批可扩展性次细胞生长以及产量具有很高的一致性。
3. 冯巴赫瓶(Fernbach)
以法国生物学家AugusteFernbach的名字命名的培养瓶,其实在摇瓶的基础上进行了改进。增大了摇瓶的底部面积,因此增加了培养基和空气中的氧气交换面积。平开口和螺纹开口两种选择,因此可选择GL45透气盖。大开口降低了转移培养基的难度。底部的挡板,增加瓶子摇晃时的液体流动以增大液体与氧的接触概率。相比普通摇瓶,巴赫瓶更能提高产物产率。