湿电转膜仪有哪些注意事项？

1、请勿在本仪器上颠倒极性，否则会导致不锈钢阴极腐蚀和生锈。 如果发生这种情况，则应使用温和的磨蚀性清洁剂清洁不锈钢以去除锈迹。

2.用本仪器不要超过25V。这可能会损坏电极。

3.除非另有特别说明，否则请勿调节转移缓冲液的pH值。 请仔细按照说明进行操作。 如果未指示，则调节转移缓冲液的pH值将导致增加缓冲液的电导率。 这表现为电源电流表显示的初始电流输出高于预期。 监控每次运行之前，请使用200/20型电源提供缓冲电阻，以确保适当的缓冲电导率。

4.不建议长时间转移。 请勿使本仪器保持连接状态。 在半干印迹过程中，焦耳热会迅速产生。 传输时间超过2小时会损坏本机。

5.电源要求。 Trans-Blot SD单元只能与微处理器控制的200 / 2.0型电源或1000/500型电源一起使用。

6.请勿在超过50℃的环境温度下操作该仪器。

7.缓冲液的准备非常重要。除非另有说明，否则请勿通过添加酸或碱来调节转移缓冲液ph。 缓冲液的准备不当会导致过热和安全隐患。 仅使用优质试剂等级甲醇。 污染的甲醇可导致转移缓冲液电导率增加，以及大分子的转移不良。

8.电泳后，在转移缓冲液中平衡凝胶。 平衡有助于去除电泳缓冲液和去污剂。如果不去除盐，它们将增加转移缓冲液的电导率和转移过程中产生的热量。 同样，低百分比的凝胶（<12％丙烯酰胺）会在含甲醇的缓冲液中收缩。 平衡允许凝胶在电泳转移之前调节至其Z终尺寸。平衡所需的时间长短取决于凝胶厚度。 例如，对于0. 75 mm SDS-PAGE凝胶，需要15分钟。低分子量大分子10，000道尔顿）可能更容易从凝胶中扩散出来。通过在电泳过程中多次改变预平衡缓冲液，可以允许适当的凝胶预平衡。 预平衡期相对较短。 这将有助于限制低分子量大分子的扩散，同时提供有效的减盐效果。

9.将膜切成凝胶尺寸。 将膜以45度角缓慢滑入转移缓冲液中并使其湿润浸泡15-30分钟。 膜的完全润湿对于确保适当的结合非常重要。 突然润湿会导致气泡滞留在基质中，这些气泡会阻止转移

分子。 为避免膜污染，处理膜时请始终使用镊子或戴手套。

10.将滤纸切成凝胶尺寸。 两张超厚滤纸（或四张厚纸或六张纸每个凝胶/膜三明治都需要每种凝胶都需要滤纸）。 通过浸入转移缓冲液完全浸透滤纸。