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细菌DNA的提取方法有哪些?

浮云女将 2019-08-14
细菌DNA的提取方法有哪些?
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絔先森

答:一、水煮模板法——主要用于PCR反应

操作Z简便,对试剂条件要求低。缺点是纯度不够高,可能会含有RNA、蛋白等杂质。但是作为一般检测目的的PCR反应模板已经足够了。

二、CTAB/NaCl 法

CTAB/NaCl法提取的DNA纯度较高,蛋白杂质较少,保存时间长,编者更喜欢把终浓度为20μg/ml RnaseA加在第5步温育的时候,这样Z后没有RnaseA污染。每一步操作细致一些,得到的DNA可用于Southern blot。

注意:长时间保存DNA可放于-20℃,但要尽量减少反复冻融,否则影响DNA质量。

三、盐析法

介于方法一和方法二之间,CTAB虽然取出糖分效果较好,但CTAB本身也是有毒的,所以此方法放弃了CTAB。

实验注意:提基因组Z好要将枪头尖剪掉(剪掉以后在酒精灯上迅速过一下,使其断口圆滑)。以免枪头损伤基因组,抽干时Z好是风干。

0 0 2019-08-14 0条评论 回复
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