答:一、水煮模板法——主要用于PCR反应
操作Z简便,对试剂条件要求低。缺点是纯度不够高,可能会含有RNA、蛋白等杂质。但是作为一般检测目的的PCR反应模板已经足够了。
二、CTAB/NaCl 法
CTAB/NaCl法提取的DNA纯度较高,蛋白杂质较少,保存时间长,编者更喜欢把终浓度为20μg/ml RnaseA加在第5步温育的时候,这样Z后没有RnaseA污染。每一步操作细致一些,得到的DNA可用于Southern blot。
注意:长时间保存DNA可放于-20℃,但要尽量减少反复冻融,否则影响DNA质量。
三、盐析法
介于方法一和方法二之间,CTAB虽然取出糖分效果较好,但CTAB本身也是有毒的,所以此方法放弃了CTAB。
实验注意:提基因组Z好要将枪头尖剪掉(剪掉以后在酒精灯上迅速过一下,使其断口圆滑)。以免枪头损伤基因组,抽干时Z好是风干。