样品预处理：加入70ul硼酸缓冲液，漩涡15s，迅速加入10ulAQC衍生试剂，漩涡15s，室温放置1min后，将其放于55℃干燥箱10min 色谱柱：C18（250mm×4.6mm 5um） 流动相：A 乙酸钠缓冲液 B 乙腈 梯度：初始为10％ 10min为10％ 20min为20％ 30min为20％ ... 样品预处理：加入70ul硼酸缓冲液，漩涡15s，迅速加入10ulAQC衍生试剂，漩涡15s，室温放置1min后，将其放于55℃干燥箱10min
色谱柱：C18（250mm×4.6mm 5um）
流动相：A 乙酸钠缓冲液 B 乙腈
梯度：初始为10％ 10min为10％ 20min为20％ 30min为20％ 30.01min为10％ 40minStop
标样同样处理，但为什么检测不出赖氨酸的峰值？请教专业人士解答！回答满意加高分！
梯度方法不对。如果我没有记错，应该有一段时有机相90%的比例。大概是10min的时候？应该是有机相比例太小了，所以没有洗脱出来。
这样啊……那么我们先排除流动相的原因。你的衍生试剂是什么时候买的？或是自己配制的？因为衍生试剂是有活性的。所以固体物质必须是放置在4℃的温度下冷藏。如果是配制溶液必须是现用现配。会不会是购买时间比较长了所以失去活性了？包括硼酸缓冲液也是大约一周就要重新配一次的。
我们当时是柱前衍生实验，所以没有涡旋条件。你的实验方法是标准条件吗？那个55℃干燥十分钟的条件让我很奇怪。是干燥加了衍生物和硼酸缓冲液的混合溶液吗？
多问一句：你的波长设置是多少？没有问题吗？
我当时做的时候用的是安捷伦提供的衍生方法，磷酸盐缓冲液（5.5gNaH2PO4→1000ml水，用10N NaOH调节pH至7.8）（A）-乙腈：甲醇：水（45：45：10）（B）
时间 B(%)
0 0
1.9 0
18.1 57
18.6 100
22.3 100
23.2 0
26 0
当时的柱子是150的C18短柱，赖氨酸似乎出峰时间比较靠后。所以我怀疑是你的有机相不够。
评论
尹晓爱9431 
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