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胆碱酯酶测农残 原理

哦草萌の549 2013-09-24
我目前实习在超市做快速检测 现在我对农残的实验有疑问 希望能解答一下 实验的大概过程是 向蔬菜提取液中加入胆碱酯酶和显色剂 然后37度水浴15分钟 之后加入底物 等3分钟 上紫外分光光度计 检测 由电脑导出结果 但我发现导出的结果基本时时都在发生变化... 我目前实习在超市做快速检测 现在我对农残的实验有疑问 希望能解答一下 实验的大概过程是 向蔬菜提取液中加入胆碱酯酶和显色剂 然后37度水浴15分钟 之后加入底物 等3分钟 上紫外分光光度计 检测 由电脑导出结果 但我发现导出的结果基本时时都在发生变化(逐渐变低 大概每10秒20ppb) 这种状况正常吗? 另外问一下这种酶YZ分光光度法 是通过胆碱对吸光度的影响 导出的结果 还是通过酶和农残生成的化合物对吸光度的影响 导出的结果? 或者是通过是那么别的? 而且我目前的这种状况测出来的数值可信吗 (应该不是我实验操做的问题 因为我已经做了一个礼拜了 还有别的同学也再做 情况都一样)
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柏樱彬
我做过半年多的农药残留检测,还比较熟悉。你的方法应该是国标的方法,该方法目前只能定性检测还不能定量,定量也没必要。“ 但我发现导出的结果基本时时都在发生变化(逐渐变低 大概每10秒20ppb)”你的这句话我没完全看懂。国标的原理是胆碱酯酶跟底物反应后生成的物质会使显色剂变色,在412nm处的吸光值会增加,假设3分钟的变化值为ΔA0;当有农药存在时,酶的活性被YZ,导致变色变慢,这样3分钟的吸光度变化值ΔAt会变小,当ΔAt小于ΔA0的50%时,认为农药残留超标。原理并不难,酶的活性是关键。还有什么问题可以问我。
3 0 2013-09-25 0条评论 回复
maggieyi886
无意看到这个了,虽然不是搞你这行的,但感觉原理都一样吧,酶促反应,不加入终止剂的话是会持续反应的,而实际工作中我发现,就是加入了终止剂,在时间上也是会有少许差异的,因此试剂说明书上一般都会标注***时间内完成比色
2 0 2013-10-01 0条评论 回复
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