微卫星检测种群遗传多样性，pcr反应中的问题

请问， 1.用微卫星检测种群多样性时，pcr反应中的模板是所有个体的混合吗，还是，一个个体模板加所有的微卫星引物？ 2.因为有很多模板和很多对微卫星引物，那么pcr中个试剂究竟是怎么加的？ 3.pcr时的退火温度是针对很多的微卫星引物设置退火梯度还是怎么的... 请问， 1.用微卫星检测种群多样性时，pcr反应中的模板是所有个体的混合吗，还是，一个个体模板加所有的微卫星引物？ 2.因为有很多模板和很多对微卫星引物，那么pcr中个试剂究竟是怎么加的？ 3.pcr时的退火温度是针对很多的微卫星引物设置退火梯度还是怎么的？ 4.还有就是在检测时只能用8%非变性聚丙烯酰胺吗？染色可以用EB 吗