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PCR技术延伸是怎样终止的?若给出的DNA片段不存在终止子。

yinrui0062 2011-02-24
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十几年x
他有上下两个引物,相对而行的,比如abcdefgh,上游引物对应b,复制得bcdefgh,下游引物对应e,当利用上游引物复制的来的片段作模板时,就只能复制到b了,得bcde的目的片段,而该目的片段又继续复制就得了许多片段了
8 0 2017-11-24 0条评论 回复
yangshao327
PCR合成带有终止序列的DNA时,终止序列会因为缺乏复制终止相应因子而无法生效。

PCR是人工设定程序的合成反应,按照一个一个循环来,比如设定30个循环,则Z终理论上将合成2的30次方段DNA,但实际上由于酶活性限制及一些片段的损耗,大概只能得到一百万条目的基因(一百万是经验所得)。

PCR有两种终止方法:diyi是程序结束,就是我设定的30个循环都跑完了;第二是NMP(N=A、T、C、G)原料用完。
3 0 2011-02-25 0条评论 回复
wq1102521807
不需要终止子,
靠两端结合的引物,使得再引物两端的序列被选择性的扩增。
这一轮结合的引物,成为本轮扩增的起始部分。得到的产物成为下一轮的模板,这时引物就成为扩增的末端了。因此引物自然地选择了扩增区域。
19 0 2011-02-25 0条评论 回复
nimeinimei555
PCR延伸终止不需要终止子,常规的反应分变性(94℃),退火(依引物而定)和延伸(72℃)三步。延伸时间依据所要扩增的片段的长度而定,常规的taq酶每分钟延伸1000个左右的碱基。延伸时间结束后,温度升高,DNA解链,延伸就终止了。
16 0 2011-02-25 0条评论 回复
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