PCR模板是100bp-200bp的片段,用SSR引物扩增的时候,出现的不是单一的目的带,目的带出现的同时还有许多非特异性扩增条带,有时候就是条带扩不出来,对于小片段模板的扩增,怎样能扩出单一条带?请教!
这个,出现非特异性扩增估计跟模板,引物,以至于反应条件都有关系。
可以减少延伸时间,因为你扩的片段很小,没有必要花很长时间延伸。
我P SSR的程序是94度 35s
55度 35s
72度 45s
前面的预变性和Z后的延伸时间都可以随便定,没有严格要求。
如果还不行的话,你可以把模板或者引物换一换,看看有没有效果。