如果RNA中有DNA污染一定会对实验有一定的影响的。
1. 如果你扩增的基因有内含子,那么跨内含子设计引物可能不会有非特异扩增。但是如果DNA残留多的话会对PCR酶产生影响,扩增效率有收到YZ。
2. 如果你的基因没有内含子,那么有DNA扩增就会增强扩增信号(Real-Time信号会虚高,普通RT-PCR条带会比实际的亮),干扰到Z终的分析结果。
3. 如果你的基因本身有内含子,而你没有特别设计引物,DNA残留稍微多一点那么你有可能会在Real-Time结果分析中看到溶解曲线有杂峰,或者在RT-PCR中出现非特异带。
建议你使用DNaseI处理步骤的试剂盒提取RNA,比如RNAprep系列(TIANGEN)的试剂盒或者使用TIANGEN的去基因组RT试剂盒FastQuant RT Kit(With gDNase),去基因组和RT总共只需要十几分钟。即使有非常严重的DNA污染都能去除的很干净,不会影响实验,而且价格和普通的RT试剂盒几乎一样很划算也很方便,你可以试试。