RNA提取时,加氯仿后分三层:水相(含rna,可能还有少量DNA),中间白色薄层(应该是蛋白和DNA),下层有机相(氯仿和蛋白等) 有几个疑问: 1.dna是核酸,核酸不溶于醇等有机溶液,但可溶于水。那DNA也应该和RNA一样主要溶于上层水相吧? 2.蛋白属有机物,... RNA提取时,加氯仿后分三层:水相(含rna,可能还有少量DNA),中间白色薄层(应该是蛋白和DNA),下层有机相(氯仿和蛋白等)
有几个疑问:
1.dna是核酸,核酸不溶于醇等有机溶液,但可溶于水。那DNA也应该和RNA一样主要溶于上层水相吧?
2.蛋白属有机物,应溶于下层有机相吧 ?
3.既然DNA溶于水相了,蛋白溶于有机相了,那中间的白色薄层又是什么?
4.氯仿是重质有机溶剂,所以比水重,在下层。那如果白色中间层是DNA和蛋白,DNA和蛋白是大分子,应该比氯仿重才对,即白色中间层应在有机相的下面才对,怎么在中间呢?
如果能让我完全明白会额外给20分。谢谢!
蛋白质在有机溶剂中变性所以形成沉淀,中间那白色的是变性的蛋白质。
我们做过提取DNA的实验,用的是饱和酚提取的,后来又用了氯仿的。DNA、RNA很容易被分解,特别是RNA,RNA酶到处都有,我们在做DNA提取时用到EDTAYZDNA酶的活性,防止被降解。
分层不是看分子的大小的,看它在离心力的作用下运动的快慢,一般密度大的运动的快一些在下面。
下层有机相中有一些脂类