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针对GX液相色谱仪,在做含有缓冲液的流动相时,一般要冲多久的柱子?

happyzzl7303 2012-05-27
GX液相色谱仪,做完样品以后一般柱子冲多久保存柱子,我师父说,在进流动相之前,和做完样品以后,冲洗柱子。都要看基线平不平,但我问朋友,他说是根据柱长来的....... GX液相色谱仪,做完样品以后一般柱子冲多久保存柱子,我师父说,在进流动相之前,和做完样品以后,冲洗柱子。都要看基线平不平,但我问朋友,他说是根据柱长来的....
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石上清泉1118
冲柱时间的长短,要看你的色谱柱。
柱长决定流动相的缓冲时间。按照标准执行,需要冲10倍的柱体积。不过如果是研发做实验,通常会节省一些时间。250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了。

反相色谱柱,比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水(或乙腈水)来过渡半小时,然后冲缓冲盐的流动相平衡进样。结束后用10%的甲醇水(或乙腈水)过渡半小时,然后用纯甲醇(或纯乙腈)保存色谱柱半小时。

这样做的主要原因是,流动相中的缓冲盐不可以直接遭遇纯有机相。因为溶解度等原因,可能会出现盐析现象。所以会用甲醇水做过渡。

你在冲流动相的时候可以观察基线,平衡后就可以进样分析。但是冲洗色谱柱的时候和基线没有关系。冲洗色谱柱主要是洗去色谱柱中残留的流动相和样品,避免他们对固定相,也就是你色谱柱的填料产生影响。
8 0 2016-12-01 0条评论 回复
欧阳静射手
做缓冲盐要先用大比例水的流动向把盐冲出来之后用甲醇或乙腈冲洗,每种流动向冲洗量不低于20倍柱体积。
20 0 2012-05-30 0条评论 回复
2360818807
各种缓冲液的极性不同,柱子填充的料也不同,所以冲洗的时间不一样,一般要冲30-60分钟后换不同等级的甲醇或乙腈,
4 0 2012-06-02 0条评论 回复
韶霸痪2q58
各种缓冲液的极性不同,柱子填充的料也不同,所以冲洗的时间不一样,一般要冲30-60分钟后换不同等级的甲醇或乙腈,
9 0 2012-05-28 0条评论 回复
rshua1112
用完缓冲液后,一般我用10:%甲醇冲30、40分钟,然后用纯甲醇冲30、40分钟;实际是根据柱长来的,一般是十倍柱体积。25的柱子柱体积20ml左右,15的柱子柱体积10ml左右。
9 0 2012-05-29 0条评论 回复
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