破碎细胞后,提取上清液是否需用什么过滤?否则得到的上清液会有杂质。离心速度过大是否会使蛋白质沉淀?... 破碎细胞后,提取上清液是否需用什么过滤?否则得到的上清液会有杂质。
离心速度过大是否会使蛋白质沉淀?
所用样品放在冰盒中,因为超声破碎会发大量的热,如果温度过高会使蛋白变性,设置功率,超4秒,停8秒,看你量的决定超的循环数,一般100次足够了。
要提蛋白的话不能说是用什么过滤,而是离心。
不知道楼上说的超声15秒能破碎多少细胞,反正我看没戏。
离心的话8000rpm就可以 ,当然看你提什么蛋白了,如果某一种蛋白的话,还学要做电泳之类的才可以彻底分开。
千万不要听楼上的,尤其是第二步,如果你辛辛苦苦提的蛋白给煮沸了,那蛋白不就变形了吗? 你的工作就都白做了。