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AKTA蛋白纯化系统分离时电导率变化意味着什么?求!

liuying0027 2012-05-02
使用AKTA分离纯化蛋白的时候,280nm检测一直没有变化,但是电导率在某一时间出现几个峰值,如何解释?
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gtbhtrhy
电导率变化说明洗脱液中的盐浓度变了,如果你做的是梯度洗脱的话,280nm没有一点反应,那你可以提高你的盐浓度。或者直接做个0-1的梯度!

想问下你是什么填料?如果你的缓冲液没有问题,那么就是有种可能,你的柱子在上次使用后没有再生,也就是还有东西在柱子上面,被你的缓冲液给洗脱下来了,这种物质在280处没有吸收。建议你用1M的NaOH冲下柱子,根据你填料的性质也可以提高NaOH的浓度,但GE的胶一般不超过2M。

你观察下你的电导开始起峰的体积减去你的柱体积,得到的体积在unicorn里面的logbook里有什么操作没?

你也可以把你的原始图谱发给我看看!
20 0 2012-05-22 0条评论 回复
韩静菲1
可能是你加入样品是引入的盐浓度的变化
9 0 2012-05-11 0条评论 回复
大时代910
电导率是检测你溶液中的盐浓度的变化。
5 0 2012-05-03 0条评论 回复
pp800331
如上所说,电导率变化说明你的溶液离子浓度变化,引起的原因可能是1.你更换了溶液,但这个溶液的更换未能使你的目的蛋白被洗脱,所以UV检测未变化而电导变化了;2.如果是同一溶液,那么可能是你的溶液配置时未完全混匀,导致离子浓度不均一。希望我的回答对你有帮助。

问一下,你用的是上面柱子?
10 0 2012-05-11 0条评论 回复
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