电导率变化说明洗脱液中的盐浓度变了,如果你做的是梯度洗脱的话,280nm没有一点反应,那你可以提高你的盐浓度。或者直接做个0-1的梯度!
想问下你是什么填料?如果你的缓冲液没有问题,那么就是有种可能,你的柱子在上次使用后没有再生,也就是还有东西在柱子上面,被你的缓冲液给洗脱下来了,这种物质在280处没有吸收。建议你用1M的NaOH冲下柱子,根据你填料的性质也可以提高NaOH的浓度,但GE的胶一般不超过2M。
你观察下你的电导开始起峰的体积减去你的柱体积,得到的体积在unicorn里面的logbook里有什么操作没?
你也可以把你的原始图谱发给我看看!