1.温度: 温度是影响蛋白质稳定的Z重要因素,温度越高,蛋白质的稳定性越低,对绝大多数蛋白质而言,在0~4℃之间较为稳定。但嗜热生物的蛋白质是例外。
2.蛋白酶:蛋白在纯化过程中常受到蛋白酶的降解,缩短纯化时间和降低温度将会减少目标蛋白的降解。在纯化过程的早期加入蛋白酶YZ剂对YZ蛋白的降解也十分有益。
3.缓冲液组成:有许多分子对蛋白质的结构有稳定效果,在纯化过程中可以用来保护不稳定蛋白,适宜的溶剂,合适缓冲液的离子强度也有助于稳定蛋白质。
4.摇动和剪切:蛋白质在摇动和剪切作用下可能变性,所以在纯化蛋白时应避免剧烈搅拌和摇晃。