纳氏试剂法测氨氮的详细步骤

　　纳氏试剂比色法是一种测定饮用水、地面水和废水中铵的方法.其原理是：以游离的氨或铵离子等形式存在的铵氮与纳氏试剂反应生成黄棕色络合物，该络合物的色度与铵氮的含量成正比，可用目视比色和分光光度法测定.目视比色法测定时，Z低检出浓度为0.02mg/L，上限浓度为2 mg/L；分光光度法测定时，Z低检出浓度为0.05 mg/L，上限浓度为2 mg/L.本方法已定为国家标准分析方法（GB7479-87）。
一、原理
和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡黄棕色胶态化合物，其色度与氨氮含量成正比，通常可在波长410—425nm范围内测其吸光度，计算其含量.本法Z低检出浓度为0.025mg/L（光度法），测定上限为2mg/L.
二、仪器
1．500mL全玻璃蒸馏器 .
2．50mL具塞比色管.
3．分光光度计.
4．pH计.
三、试剂
配制试剂用水均应为无氨水.
1．无氨水：可用一般纯水通过强酸性阳离子交换树脂或加硫酸和高锰酸钾后，重蒸馏得到.
2．1mol/L氢氧化钠溶液.
3．吸收液：①硼酸溶液：称取20g硼酸溶于水中，稀释至1L.
②0.01mol/L硫酸溶液.
4．纳氏试剂：称取16g氢氧化钠，溶于50mL水中，充分冷却至室温.
另称取7g碘化钾和(HgI2)溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中.用水稀释至100mL，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存.
5．酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)溶于100mL水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至100mL.
6．铵标准贮备溶液：称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵(NH4Cl)溶于水中，移入1000mL容量瓶中，稀释至标线.此溶液每毫升含1.00mg氨氮。
7．铵标准使用溶液：移取5.00mL铵标准贮备液于500mL容量瓶中，用水稀释至标线.此溶液每毫升含0.010mg氨氮。
四、测定步骤
1．水样预处理：无色澄清的水样可直接测定；色度、浑浊度较高和含干扰物质较多的水样，需经过蒸馏或混凝沉淀等预处理步骤.
2．标准曲线的绘制：吸取 0 、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0mL铵标准使用液于50mL比色管中，加水至标线，加1.0mL酒石酸钾钠溶液，混匀.加1.5mL纳氏试剂，混匀.放置10min后，在波长420nm处，用光程10mm比色皿，以水为参比，测定吸光度。
由测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含量（mg）对校正吸光度的标准曲线。
3．水样的测定：分取适量的水样（使氨氮含量不超过0.1mg），加入50mL比色管中，稀释至标线，加1.0mL酒石酸钾钠溶液（经蒸馏预处理过的水样，水样及标准管中均不加此试剂），混匀，加1.5mL的纳氏试剂，混匀，放置10min。
4．空白试验：以无氨水代替水样，作全程序空白测定。
五、计算
由水样测得的吸光度减去空白实验的吸光度后，从标准曲线上查得氨氮含量（mg）.
氨氮(N，mg/L)=m×1000/V
式中：m­——由校准曲线查得样品管的氨氮含量（mg）；
V——水样体积（mL）.
注意事项
1、纳氏试剂中与碘化钾的比例，对显色反应的灵敏度有较大影响.静置后生成的沉淀应除去.
2、滤纸中常含痕量铵盐，使用时注意用无氨水洗涤.所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的沾污。