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SDS-PAGE中上层胶为什么用pH6.8下层胶用pH8.8?

浅景韵 2008-11-15
电泳胶
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cookiefanfan
上层的浓缩胶用的是Tris-HCL缓冲液,PH6.8,HCL的解离度大,几乎全部成CL-,CL-在电场中移动Z快。而电泳槽中含有甘氨酸,在PH6.8时只有少量解离,在电场中移动的Z慢。蛋白质(被夹在中间)就在由快慢离子形成的电位梯度中被浓缩了。
下层的分离胶用的是Tris-甘氨酸缓冲液,PH8.8,在此PH下,甘氨酸解离度增大,泳动速度增加并超过了蛋白质,原先的电位梯度消失,大小形状不同的蛋白质在电场中分离。
6 0 2017-10-11 0条评论 回复
叶穿弯弯
因为二者的目的是不一样的,上层是一种浓缩胶,它是要把蛋白质浓缩。下层胶是分离胶,是要把蛋白质分离的。用途不一样当然会有不同的结果
17 0 2008-11-16 0条评论 回复
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