是哪两种办法??有人说其中一条途径是以目的基因转录成的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需要的基因 但是这个不是属于从自然界中获取么 跟PCR扩增类比 没什么差别 那为什么属于人工合成目的基因??? 哪俩... 是哪两种办法??有人说其中一条途径是以目的基因转录成的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需要的基因 但是这个不是属于从自然界中获取么 跟PCR扩增类比 没什么差别 那为什么属于人工合成目的基因??? 哪俩种办法啊???谢谢了
人工合成基因有以下两种办法:
一·基因工程。
(一)概念:基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。
基因工程的原理及技术
原理:基因重组
diyi步:目的基因的获取
1.目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因 。
2.原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。
3.PCR技术扩增目的基因
(1)原理:DNA双链复制
(2)过程:diyi步:加热至90~95℃DNA解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
第二步:基因表达载体的构建
1.目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。
2.组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因
第三步:将目的基因导入受体细胞_
1.转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2.常用的转化方法:
将目的基因导入植物细胞:采用Z多的方法是 农杆菌转化法。
将目的基因导入动物细胞:Z常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞多是 受精卵。
3.重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。
第四步:目的基因的检测和表达
1.首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用 DNA分子杂交技
术。
2.其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA,方法是采用 用标记的目的基因作探针与mRNA杂
交。
二·蛋白质工程
1·概念:蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰
或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需
求。(基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质)
2·蛋白质工程崛起的缘由:基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。
3·蛋白质工程的基本原理:它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构,又称为第二代的基因工
程。
4·基本途径:从预期的蛋白质功能出发,设计预期的蛋白质结构,推测应有的氨基酸序列,找到
相对应的脱氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白质工程特有的途径;以下按照基因工程的一般步骤
进行。(注意:目的基因只能用人工合成的方法)