基因测序原理是什么？

DNA测序的方法有很多种. 目前Z常见的是双脱氧终止法了. 在测序用的缓冲液中含有四种dNTP及聚合酶. 测序时分成四个反应， 每个反应除上述成分外分别加入2，3-双脱氧的A， C， G， T核苷三磷酸(称为ddATP， ddCTP， ddGTP， ddTTP)， 然后进行聚合反应. 在diyi个反应物中， ddATP会随机地代替dATP参加反应一旦ddATP加入了新合成的DNA链， 由于其3位的羟基变成了氢， 所以不能继续延伸. 所以diyi个反应中所产生的DNA链都是到A就终止了; 同理第二个反应产生的都是以C结尾的; 第三个反应的都以G结尾， 第四个反应的都以T结尾， 电泳后就可以读出序列了. 也许这样说你不一定明白. 举一个例子， 假如有一个DNA， 互补序列是GATCCGAT， 我们试着做一下:
在diyi个反应中由于含有dNTP+ddATP， 所以遇到G， T， C三个碱基时没什么问题， 但遇到A时， 掺入的可能是dATP或ddATP， 比如已合成到G， 下一个如果参与反应的是ddATP则终止， 产生一个仅有2个核苷酸的序列: GA， 否则继续延伸， 可以产生序列GATCCG， 又到了下一个A了. 同样有两种情况， 如果是ddATP掺入， 则产生的序列是GATCCGA， 延伸终止， 否则可以继续延伸， 产生GATCCGAT.
所以在diyi个反应系统中产生的都是以A结尾的片段:
GA， GATCCGA，
同理在第二个反应中产生的都是以C结尾的片段:
GATC， GATCC，
在第三个反应中产生的都是以G结尾的片段:
G， GATCCG
在第四个反应中产生的都是以T结尾的片段:
GAT， GATCCGAT，
电泳时按分子量大小排列， A反应的片段长度为2， 7; C反应的为4， 5; G反应的为1， 6; T反应的为3， 8， 四个反应的产物分别电泳， 结果为

8 7 6 5 4 3 2 1

A | |
C | |
G | |
T | |

我们可以从右向左读， 为GATCCGAT， 至此， 测序完成(上面这个图在百度知道中显示不正常， 因为百度知道的网页用的是比例字体， 你如果想看它， 拷贝到记事本中， 用等宽的字体来看).