各位大侠,需要收集上皮性卵巢癌组织提取RNA和蛋白质,有几个问题请大家帮忙解决:1、要提RNA和蛋白质,取的组织需要分开保存么?2、由于条件限制,没有小的液氮罐,考虑RNAlater比较... 各位大侠,需要收集上皮性卵巢癌组织提取RNA和蛋白质,有几个问题请大家帮忙解决:1、要提RNA和蛋白质,取的组织需要分开保存么?2、由于条件限制,没有小的液氮罐,考虑RNAlater比较贵,组织取好后半小时内放进-80℃冰箱,行不行?这样可以保存多久?3、组织取好后需不需要立即用PBS洗掉上面的血液?谢谢!
方法可以参考 法师药材店 的,但组织取好半小时再放进- 80℃冰箱,拖的时间太长了;如果是生物体取下,半个小时样品内部的RNA就全降解了,尤其是 癌细胞!!!
如果是培养的细胞系,在常温还是可以多活一段时间:
无论是生物离体组织还是细胞系,用PBS 洗洗都是比较好的,洗掉一些其他液体成分又保持 目的组织的短时间正常生理活动,但要快!
综合你的条件:没有小的液氮罐,事先将研钵内加满液氮,液氮会持续的挥发,继续加一直到研钵温度也超低至研钵里的液氮不沸腾了,取样后用pbs快速冲洗下,就在液氮里研磨,一次性研磨搞定,然后加入 Trizol,用量大概是50mg/ml,癌细胞不好提取啊,成分复杂,祝你成功!!!