仪器社区

细菌总DNA怎样提取和鉴定

xzxmyzx1 2016-12-21
评论
全部评论
77808963
细菌总DNA的提取 将菌株接种于液体LB培养基,37℃震荡培养过夜.取1.5ml培养物12000rpm离心2min.沉淀物加入567 ul的TE缓冲液,反复吹打使之重新悬浮,加入30ul 10%SDS和15ul的蛋白酶K,混匀,于37℃温育1h.加入100ul 5mol/L NaCl, 充分混匀,再加入80ul CTAB/NaCl溶液,混匀后再65℃温育10min.加入等体积的酚/氯仿/异戊醇混匀,离心4-5min, 将上清转入一只新管中,加入0.6-0.8倍体积的异丙醇,轻轻混合直到DNA沉淀下来,沉淀可稍加离心.沉淀用1ml的70%乙醇洗涤后,离心弃乙醇,在洁净工作台中稍加干燥,重溶于20ul TE缓冲液(含RNaseA﹤25ng/ml)中,准备电泳检测. 
4 0 2016-12-22 0条评论 回复
您可能感兴趣的社区主题
加载中...
发布 评论