沉降菌、浮游菌监测.
4.1.7培养基平皿的制备:将直径9cm的培养皿经160℃干燥灭菌2小时备用。按培养基的管理及培养基的配制使用和制备营养琼脂培养基,取已配制好的营养琼脂培养基加热溶化,并冷却至45℃时,在无菌操作区将约15-20 ml培养基注入培养皿。待凝固后,倒置平皿培养,30℃-35℃培养48小时。检查有无菌生长。无菌生长的培养皿宜在2~8℃环境中保存,待用。
4.2测试方法
4.2.1沉降菌测定时,培养皿应放置在有代表性和气流扰动极小的地方。
4.2.2采样点的位置:工作区测点位置离地0.8m~1.5 m左右(略高于工作区);送风口检测点位置离开送风面30cm左右。
4.2.3培养皿数与采样点数根据房间面积放置,见洁净室监测程序SOP 02-QA-02-029后附表:沉降菌、浮游菌、悬浮粒子测试点分布图(JZ-PM-002-01)
4.2.3.1Z低限度采样点数及Z少培养皿数
面 积(m2) 洁净级别
100级 10000级 100000级
<10 2-3 2 2
≥10~<20 4 2 2
≥20~<40 8 2 2
≥40~<100 16 4 2
≥100~<200 40 10 3
≥200~<400 80 20 6
≥400~<1000 160 40 13
(注:表中面积指:对于单向流(层流)洁净区,是指送风面面积;对于乱流(非单向流)洁净区,是指房间面积。)
4.2.4将培养皿放置在采样点处,打开盖子,将盖子口朝下,靠在皿上,放置30min,盖上盖子,放于不锈钢桶中或用铝箔包好。将培养皿放置培养箱中,30℃-35℃、48小时培养记数。用肉眼直接计数、标记,若平板上有2个或2个以上的菌落重叠,可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数,结果按平皿菌落数的Z大值计数。
4.2.5对照:在各洁净区的做沉降菌检测时,取空白培养基做阴性对照。
4.3检测标准:
洁净级别 100级 10000级 100000级
标准(菌落数Z大允许值)
个/(Φ90mm·0.5h) 平均≤1 平均≤3 平均≤10
4.4注意事项
测试前应仔细检查每个培养皿的质量,培养基及培养皿有变质、破损或污染的不能使用。