在动物细胞培养中常用到一种培养基叫199培养基(液),它的命名是怎么来的?... 在动物细胞培养中常用到一种培养基叫199培养基(液),它的命名是怎么来的?
发酵培养基从广义上而言,是指可供微生物细胞生长繁殖所需的一组营养物质与原料。同时其也为微生物培养提供其他所必须的条件。 发酵培养基的基本作用在于满足菌体的生长,促进产物的形成。
基本要求
培养基能够满足产物Z经济的合成。
发酵后所形成的副产物尽可能的少。
培养基的原料应因地制宜,价格低廉;且性能稳定,资源丰富,便于采购运输,适合大规模储藏,能保证生产上的供应。
所选用的培养基应能满足总体工艺的要求,如不应该影响通气、提取、纯化及废物处理等。
培养基按其组成物质的纯度、状态、用途可分为三大类型。
按纯度
合成培养基
是指原料其化学成分明确、稳定的培养基。适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律,但是培养基营养单一,价格较高,不适合用于大规模工业生产。
天然培养基
这一类培养基采用天然的原料,所以其原料来源丰富(大多为农副产品)、价格低廉、适于工业。然而原料质量等方面不加控制会影响生产的稳定性。
按状态
固体培养基
适合于菌种和孢子的培养和保存,也广泛应用于有子实体的真菌类,如香菇、白木耳等的生产。
半固体培养基
在配好的液体培养基中加入少量的琼脂,一般用量为0.5%~0.8%,主要用于微生物的鉴定。
液体培养基
80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分,是发酵工业大规模使用的培养基。
按用途
培养基按其用途可分为孢子(斜面)培养基、种子培养基和发酵培养基三种。
培养基的设计与优化
目前还不能完全从生化反应的基本原理来推断和计算出适合某一菌种的培养基配方,只能用生物化学、细胞生物学、微生物学等的基本理论,参照前人所使用的较适合某一类菌种的经验配方,再结合所用菌种和产品的特性,采用摇瓶、玻璃罐等小型发酵设备,按照一定的实验设计和实验方法选择出较为适合的培养基。
培养基设计的基本步骤是:
根据前人的经验和培养基成分确定时一些必须考虑的问题,初步确定可能的培养基成分
通过单因子实验Z终确定出Z为适宜的培养基成分
当培养基成分确定后,剩下的问题就是各成分Z适的浓度,由于培养基成分很多,为减少实验次数常采用一些合理的实验设计方法。这些实验往往基于多因子实验,包含均匀设计、正交实验设计、响应面分析等。
发酵培养基的实例
大肠杆菌高密度培养
碳源:葡萄糖、甘油 氮源:胰蛋白胨、酵母粉 无机盐:磷、镁等
动物细胞培养基
基础培养基:F12、DMEM等 血清(5-10%):胎牛血清(FBS)、小牛血清(CS)、马血清(HS) 水:超纯水 其它:NaHCO3(CO2)、抗生素