构建好的质粒菌液pcr验证是正确的，但是就是怎么也提取不出质粒

同样的问题，我也正经历着，别着急慢慢分析原因.
如果你做得是质粒的构建，我想根本的原因是没有连接上，那得重新做，考虑连接的问题.
对于你的那个5天得菌液，原则上说菌液放久了，质粒可能会丢失，你可以重新再在抗性培养基里（如果有抗性的话）摇一下.如果没连接好的话估计也提不出质粒.