液相色谱分离游离脂肪酸为什么要衍生

一般来说液相色谱法流速用1.0ml/min的比较多。无论流速高低，都是几点：
一个保证色谱峰出峰情况良好，峰型什么的。这个参数看拖尾因子、理论板数什么的，其实目测就可以。
一个是保证分离。主峰前后色谱峰的分离度均大于1.5，Z好达到基线分离。
再有一个就是控制成本，流动相和运行时间什么的。比如一针要跑一个小时，就可以适当调整，减少进样时间。
Z后当然还有你色谱柱柱压的耐受情况。比如柱子的压力已经是20MPa了，那么不可能再加大流速了。

这些情况要综合考虑，适当调整。不过其他条件都相同的情况下，流速较高的时候，色谱峰的峰型比较好看。而且反相色谱法大多数都使用含有缓冲盐的水相，盐相在流速太低的情况下会析出。所以Z好不要低于0.5ml/min的流速。

相邻两峰保留间差与平均峰宽比值.叫辨率，表示相邻两峰离程度.R越，表明相邻两组离越.
1、般说R＜1，两峰部重叠；R=1.0，离度达98%
2、R=1.5，称6σ离，裸露峰面积99.7%.R≥1.5称完全离.《药典》规定R应于1.5.通用R=1.5作相邻两组已完全离标志.
3、R＝1，称4σ离，两峰基本离，裸露峰面积95.4%，内侧峰基重叠约2%
离度计算公式：R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)
所两峰离程度达99.7%，享仪式至少应=1.5.