支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。支原体的种类繁多、分布广泛、造成的危害相当大,涉及人、动物、植物及昆虫等多个领域,给人类健康和科研工作带来不利影响。
??从人体分离的16种支原体中,5种对人有致病性,即肺炎支原体(M.pneumoniae)、解脲支原体(Ureaplasma urealyticum)、人型支原体(M.homins)、生殖支原体(M.genitalium)及发酵支原体(M.fermentans)。
??从动物体内分离并鉴定出了几十种支原体,仅少部分引起不同程度的疾病,能造成严重危害的有四种,即:丝状支原体丝状亚种、鸡毒支原体、猪肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种。支原体广泛分布于植物与昆虫中,引起植物和昆虫病害的支原体有植原体和螺原体两大类。
支原体感染
??致病支原体中,肺炎支原体起肺炎,人型支原体、解脲支原体和生殖器支原体主要泌尿生殖道感染。支原体肺炎又称原发性非典型肺炎,支原体肺炎全年均可发病,以冬季多见,可有小流行。支原体脑炎是学龄前儿童及青年人常见的一种肺炎,支原体肺炎主要通过飞沫传播,潜伏期较长,可达2~3周。支原体肺炎虽然病程较长,肺部病变较重,炎症吸收较慢,但绝大多数预后都是良好的,合并症亦少。生殖器支原体感染是近年新明确的一种性接触传播疾病。成人主要通过性接触传播,新生儿则由母亲生殖道分娩时感染。成人男性的感染部位在尿道粘膜,女性感染部位在宫颈。新生儿主要引起结膜炎和肺炎。
支原体的实验诊断
??支原体实验室检测方法有:形态学检查、支原体培养、抗原检测、血清学方法和分子生物学方法。
解脲支原体MB抗原的研究表明:MB抗原是解脲支原体感染时被识别的主要外膜抗原,具有种特异性,包含血清特异的和交叉反应的抗原决定簇。编码MB抗原的基因长1200多个碱基、N端1/3为保守区,包含群特异的抗原决定簇:C端2/3是由重复序列组成的可变区,包含型特异的抗原决定簇,对该抗原的研究及对于研究疾病的发病机制和免疫机制起重要作用。MB抗原位于解脲支原体膜的表面,N端固定于膜上使C端重复区暴露于微生物周围的微环境。N端可以作为其分群分型的基础,C端Z可能首先与宿主的防御系统相遇而引起主要的抗体反应,是理解它的发病机制和免疫机制的基础。MB抗原与疾病的关系,以及它在疾病中的作用还有待进一步探讨。
??测定支原体抗体的血清学试验方法中,有支原体特异性血清学检测和非特异性血清学检测:支原体特异性血清学检测方法中,Z常用的是补体结合试验,另有间接免疫荧光染色检查法、生长YZ试验、代谢YZ试验、间接血凝试验、酶免疫法和酶联免疫吸附试验(ELISA)等。支原体的非特异血清学方法有肺炎支原体冷凝集试验与MG链球菌凝集试验,对支原体肺炎能起辅助诊断的作用。检测特异性抗体IgG的方法尚不能达到早期快速诊断的目的,抗原的检测为今后研究的发展方向。目前已有用酶联免疫吸附试验、荧光标记抗体、肺炎支原体膜蛋白单克隆抗体和反向间接血凝法直接检测分泌物和体液中支原体抗原的报道,具有很高的特异度和灵敏度。人体感染肺炎支原体后,能产生特异性IgM和IgG类抗体。IgM类抗体出现早,一般在感染后1周出现,3~4周达高峰,以后逐渐降低。由于肺炎支原体感染的潜伏期为2~3周,当患者出现症状而就诊时,IgM抗体已达到相当高的水平,因此IgM抗体阳性可作为急性期感染的诊断指标。如IgM抗体阴性,则不能否定肺炎支原体感染, 需检测IgG抗体。IgG较IgM出现晚,需动态观察,如显著升高提示近期感染,显著降低说明处于感染后期。由此提示IgG与IgM同时测定,可提高诊断率,达到指导用药、提高LX之目的。Savyon公司提供支原体IgM、IgG和IgA抗体ELISA检测试剂盒。
??支原体分子生物学检测方法有基因探针和聚合酶链反应(PCR)等方法。基因探针的核酸杂交法,虽然敏感性和特异性都很高,但基因探针常用同位素标记,放射性危害大,设备要求高且繁琐难以推广,近年来发展的PCR技术,使得支原体检测变得简便、快速、敏感、特异,为支原体的检测和实验研究开辟了一个广阔的前景。
tu1血清标本中的MP抗体与板上包被的MP抗原结合
tu2抗人IgG/IgM/IgA-HRP和板上的抗原抗体复合物结合
tu3加入的底物被酶分解的产物的颜色深度与标本中抗体的浓度成正比
SeroMP支原体ELISA试剂盒
本试剂盒是检测支原体肺炎的第三代产品,它通过ELISA法在酶标板上完成人血清的IgM、IgG和IgA抗体检测。沙眼衣原体感染的诊断方法有细胞培养、直接抗原检测、分子生物学和血清学方法。直接抗原检测法中获取标本(在感染部位取材)较困难,所得结果可靠性也不强。而本试剂盒采用的血清学检测以血清为标本,可检测各个部位和各个时期的肺炎衣原体感染,并且某一类型的抗体象征疾病处于一定发展阶段。
细胞培养支原体感染
??细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精氨酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是Z常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。
??支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。
??组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体Z突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如 -内酰胺类、万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体Z有YZ活性及常用于支原体感染ZL的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些氟喹诺酮;其他类抗生素如氨基糖苷类、氯霉素对支原体有较小YZ作用,所以常不用来作为支原体感染的化学ZL剂。InvivoGen公司研究开发的新一代支原体抗生素M-Plasmocin能有效地杀灭支原体,不影响细胞本身的代谢,并且用M-Plasmocin处理过的培养细胞,不会重新感染支原体。
支原体是一类比细菌小比病毒大的原核生物,广泛分布于自然界,包括一些动物与人类。到目前已从人体内分离出几种支原体,与生殖道有关,能引起生殖道疾病患的主要是解脲支原体阳性率为28%,两种支原体同时阳性者为22%。成年女性宫颈或阴道中解脲支原体检出率为40%-80%,人型支原体为21%-53%。
人体感染支原体后,它的潜伏期一般为1-3周,部分病人可无症状,约50%的病人表现为尿道有刺痒感受伴有或轻或重及排尿不畅的感觉。女性患者症状更轻,无明显尿痛或有轻微尿痛,仅可出现少量的分泌物,有时宫颈也有炎症或糜烂,男性表现为晨起尿道口痂膜或污染内裤,有时病人有症状有无分泌物,也可无症状有分泌物。感染支原体后的确可以引起不育。首先,它可以在寄居的部位引起炎症,如男性的附睾炎或前列腺炎,女性的宫颈炎、宫颈糜烂、前庭大腺炎、阴道炎、输卵管炎、盆腔炎、宫外孕等。慢性炎症的后果有可能导致输精管首和输卵管道的阻塞。还可通过局部的炎性细胞对精子造成间接损伤,通过分解尿素产生碱性环境,直接损伤输卵管上皮细胞,其次,支原体可以在精子的体部,影响其活动力,导致不育。此外,在感染了支原体的不育夫妇的血液和男方的精液中,抗精子抗体的阳性率明显高于生育正常的夫妇。抗精子抗体和支原体对精子的吸附,均可造成精子的泳动能力差,活力下降,畸形率高,精子间互相发生凝集引起不育。
要确诊是否感染支原体,只要根据临床症状再结合准确的实验室检查就不难诊断。如确诊为支原体感染的夫妇,我院根据几千例病人治LX果统计,选用敏感抗生素如喹诺酮类、氨基甙类及中药类治LX果较好。常用ZL方法如下:1、OFLX注射液或洛美沙星注射液100ml(含药0.2g)静滴,每天1次,7天为1个疗程。2、克拉霉素0.25g,每日口服2次,连用7天为一个疗程。3、中药HX化瘀、通窍利尿清浊合剂“消支汤”连服十天为一个疗程。由于支原体没有细胞壁,一些常用的抗生素,如青霉素、头孢菌素等对支原体无杀灭作用,因此不要自己乱用抗素,请在医生的指导下,选用合适药物ZL。
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支原体治好后,再化验多少次,才能认为是彻底
治好了呢?
一般这样认为,支原体停药 7—10 天以后复查,如果是阴性,那么一个月以后再做一次,如果还是阴性,三个月以后再做复查,如果都是阴性,我们认为这个患者的支原体就已经被治好了。
另外应该注意的一个问题,就是性伴侣的问题,如果患者的性伴侣检查有,两个人就应该同时ZL,如果对方没有,也应该再过一个月或两个月再复查一次,这样会更安全。
不知道你明白了没有?