根据光线对标本的照明方式,可将显微术分为透射光显微术和落射光显微术两种。
透射光显微术即是前面所述的装置,它适合于观察对光可透的标本。而落射光显微术其照明光线则是从标本上方,经过套在物镜外围的特殊的垂直照明器,从物镜周围落射到标本上,经标本反射而进入物镜,它适于观察透明度不好的标本,以及各种活体组织等。
由于落射光显微术的物镜本身起到聚光器的作用,而物镜的镜口率又是随着放大倍数而增加的,因而使标本的亮度也随着放大倍数增大而提高,并且,由于激发光不必透过载玻片而进一步减少了激发光的无效吸收,这就特别适合于高放大的荧光显微术工作。
其次,由于激发光不直接进入目镜,而仅由标本散射回来的少部份光可进入目镜,故目镜的压制滤板可以很薄。
由于以上各点,所以荧光图象的亮度在高放大时较透射光显微术强得多,比较适合于观察不透明、半透明标本,如厚片,滤膜、菌落、组织培养等的直接观察。