1。 样品的制备与提取 称取经组织捣碎机绞碎的新鲜蔬菜或水果样品 10g 于 50mL 带盖塑料离心 管中, 根据样品含水量多少加入适量的无水硫酸钠除水。 然后向离心管样品中加 入 10mL 丙酮:正己烷(3:7,体积比)混合溶剂,混匀后在超声波提取器中提取 15min,然后用滴管吸取上层液体,将提取液转移至 100mL 烧杯中。逐次向离心 管样品残渣中加入 3mL、2mL 混合提取剂,重复以上萃取、离心分离操作两次, 合并离心管上层提取液至同一烧杯中。 若合并提取液中还存在水分, 再加适量无 水硫酸钠除水。 2。 柱层析净化与浓缩 在 30cm(长)×1cm(内径)玻璃管层析柱底部加少许玻璃棉,按顺序分别装 上无水硫酸钠、中性氧化铝、和 60—100 目佛罗里硅藻土各约 1.0cm 高度,轻轻 敲实。先用 3mL 丙酮预洗层析柱,弃掉淋洗液。再将烧杯中的样品提取液全部转 移至柱内,用 3mL 丙酮:正己烷(1:2,体积比)混合洗脱剂洗脱 3 次,收集洗脱 液于接液管中。将接液管置于 50℃恒温水浴中用氮气吹脱至洗脱液体积少于 0.30mL,再转移浓缩后的洗脱液至 2mL 的样品瓶中,用正己烷定容至 1mL,加盖 密封,置于冰箱(0--4℃,由于本次实验室温较低,所以没有使用冰箱)中保存。3 。测定 在计算机上设置好液相色谱操作条件,用 50μL 微量进样器吸取 20μL 氯 氰菊酯单标准使用液进样, 绘制完整的单标准色谱图。 再用 50μL 微量进样器吸 取 20μL 样品测试瓶中的样品制备液进样,绘制完整的色谱图。
大概就是这样做。小的细节根据你的药物的性质来定。
移动相和固定相也要根据你要检测的物质来定。