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小鼠石蜡切片如何制作

感性的sining 2007-04-21
如果附上图片就更好了,谢谢
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578394871
你碰对人了,正好我这些天在做假复层立方上皮的切片
其实切片很好做,Z关键的就是你的切片机切出的薄厚怎么样
下面我给你说说程序:
1、取材与固定:?
从人或动物新鲜尸体上取下组织块(一般厚度不超过0.5厘米)投入预先配好的固定液中(10%,Bouin氏固定液等)使组织、细胞的蛋白质变性凝固,以防止细胞死后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构。?
2、脱水透明:
一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂,逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精,又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明,以二甲苯替换出组织块的中酒精,才能浸蜡包埋。
?3、浸蜡包埋:
将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中,放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋:先制备好容器(如折叠一小纸盒),倒入已溶化的石蜡,迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。冷却凝固成块即成。包埋好的组织块变硬,才能在切片机上切成很薄的切片。
?4、切片与贴片:?
将包埋好的蜡块固定于切片机上,切成薄片,一般为5—8微米厚。切下的薄片往往皱折,要放到加热的水中烫平,再贴到载玻片上,放45℃恒温箱中烘干。
?5、脱蜡染色:?
常用HE染色,以增加组织细胞结构各部分的色彩差异,利于观察。苏木精(Hematoxylin,H)是一种碱性染料,可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色,被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红(Eosin,E)是一种酸性染料,能将细胞质染成红色或淡红色,被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。染色前,须用二甲苯脱去切片中的石蜡,再经由高浓度到低浓度酒精,Z后入蒸馏水,就可染色。
HE染色过程是:?
①将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟。?
②酸水及氨水中分色,各数秒钟。?
③流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。?
④入70%和90%酒精中脱水各10分钟。?
⑤入酒精伊红染色液染色2—3分钟。
?6、脱水透明:?
染色后的切片经纯酒精脱水,再经二甲苯使切片透明。
?7、封固:?
将已透明的切片滴上加拿大树胶,盖上盖玻片封固。待树胶略干后,贴上标笺,切片标本就可使用
希望能帮的上你的忙啊
这样我就没有白累了
13 0 2007-04-22 0条评论 回复
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